公开(公告)号：CN118048370A

公开(公告)日：2024-05-17

申请号：CN202311659017.3

申请日：2023-12-05

Applicant: 南京大学 ,  南京大学深圳研究院

Inventor： 卢山 ,  吕德新 ,  葛子涵 ,  陈语凡 ,  韩东

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/70

Abstract: 一种紫菜胡萝卜素羟化酶基因及其编码蛋白和应用，它涉及一种PuCYP97B蛋白及其编码基因在紫菜类胡萝卜素代谢中的应用。该基因的核苷酸序列如序列表Seq ID No：1所示，其氨基酸序列如序列表Seq ID No：2所示。本发明可用于紫菜类胡萝卜代谢基因工程中。

公开(公告)号：CN114934094A

公开(公告)日：2022-08-23

申请号：CN202210742182.4

申请日：2022-06-27

Applicant: 南京大学 ,  南京大学深圳研究院

Inventor： 卢山 ,  宋书言 ,  吕德新 ,  唐倩

IPC: C12Q1/48 ,  C12Q1/42 ,  C12N15/70 ,  C12N9/10 ,  C07K19/00 ,  G01N30/02 ,  G01N30/72 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种短链异戊烯基转移酶活性检测方法，包括以下步骤：步骤1，对短链异戊烯基转移酶重组蛋白进行体外表达与纯化；步骤2，建立短链异戊烯基转移酶反应体系；步骤3，加入碱性磷酸酶对短链异戊烯基转移酶的产物进行水解；步骤4，利用有机溶剂将溶于水相的异戊烯基醇类化合物萃取并浓缩；步骤5，对产物进行GC‑MS分析，实现对待测物的定性分析。本发明能够同时检测所有短链异戊烯基转移酶产物，可以在体外高效获取纯化的短链异戊烯基转移酶重组蛋白，实现了对相应产物的定性及定量分析。

公开(公告)号：CN117660282A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311658656.8

申请日：2023-12-05

Applicant: 南京大学 ,  南京大学深圳研究院

Inventor： 卢山 ,  梁瀚予 ,  吕德新 ,  韩东

IPC: C12N1/21 ,  C12N9/02 ,  C12N9/90 ,  C12N15/74 ,  C12N15/65 ,  C12P23/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种用于类胡萝卜素异源合成与生产的合成生物学底盘。本发明涉及基因工程领域，提供了一种依赖蓝细菌的异源合成类胡萝卜素的方法。本发明利用了遗传背景清晰，便于进行遗传操作的蓝细菌作为异源合成类胡萝卜素的合成生物学底盘，具体地操作方法如下，主要包括对类胡萝卜素合成酶的选择，合成下游途径的组装与表达，集胞藻宿主合成前体积累的强化，最终实现在蓝细菌体内高效合成类胡萝卜素。

公开(公告)号：CN114934094B

公开(公告)日：2024-07-09

申请号：CN202210742182.4

申请日：2022-06-27

Applicant: 南京大学 ,  南京大学深圳研究院

Inventor： 卢山 ,  宋书言 ,  吕德新 ,  唐倩

IPC: C12Q1/48 ,  C12Q1/42 ,  C12N15/70 ,  C12N9/10 ,  C07K19/00 ,  G01N30/02 ,  G01N30/72 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种短链异戊烯基转移酶活性检测方法，包括以下步骤：步骤1，对短链异戊烯基转移酶重组蛋白进行体外表达与纯化；步骤2，建立短链异戊烯基转移酶反应体系；步骤3，加入碱性磷酸酶对短链异戊烯基转移酶的产物进行水解；步骤4，利用有机溶剂将溶于水相的异戊烯基醇类化合物萃取并浓缩；步骤5，对产物进行GC‑MS分析，实现对待测物的定性分析。本发明能够同时检测所有短链异戊烯基转移酶产物，可以在体外高效获取纯化的短链异戊烯基转移酶重组蛋白，实现了对相应产物的定性及定量分析。

公开(公告)号：CN118166009A

公开(公告)日：2024-06-11

申请号：CN202311659480.8

申请日：2023-12-05

Applicant: 南京大学 ,  南京大学深圳研究院

Inventor： 卢山 ,  吕德新 ,  韩东

IPC: C12N15/61 ,  C12N9/90 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 一种紫菜番茄红素ε‑环化酶基因及其编码蛋白和应用，它涉及一种PuLCYE蛋白及其编码基因在紫菜类胡萝卜素代谢中的应用。本发明中基因的核苷酸序列是序列表Seq ID NO：1所示或与序列表Seq ID NO：1核苷酸序列具有80％以上同源性且编码相同功能蛋白质的多核苷酸序列。它的氨基酸序列是序列表Seq ID NO：2所示或由序列表Seq ID NO：2所述的氨基酸经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或者添加且与序列表Seq ID NO：2所述的氨基酸残基序列具有相同活性的氨基酸序列。它用于紫菜类胡萝卜素代谢基因工程中。

公开(公告)号：CN118064457A

公开(公告)日：2024-05-24

申请号：CN202311659271.3

申请日：2023-12-05

Applicant: 南京大学 ,  南京大学深圳研究院

Inventor： 卢山 ,  吕德新 ,  韩东

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开一种紫菜玉米黄素环氧化酶基因(zeaxanthin epoxidas，ZEP)及其编码蛋白和应用，它涉及一种PhZEP蛋白及其编码基因在坛紫菜类胡萝卜素代谢中的应用。该基因的核苷酸序列如序列表Seq ID No：1所示。该基因的氨基酸序列如序列表Seq ID No：2所示。本发明可用于紫菜类胡萝卜代谢基因工程中。

公开(公告)号：CN117143891A

公开(公告)日：2023-12-01

申请号：CN202210571647.4

申请日：2022-05-24

Applicant: 南京大学

Inventor： 卢山 ,  王齐 ,  吕德新 ,  宋淑媛 ,  赵亚南

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/82 ,  C12N1/21 ,  C12P23/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种无油樟的牻牛儿基牻牛儿基二磷酸合酶基因AtriGGPPS1及其编码蛋白和应用，它涉及一种无油樟GGPPS1蛋白及其编码基因在无油樟叶绿素和类胡萝卜素代谢中的应用。该基因的核苷酸序列如序列表Seq ID No：1所示，其氨基酸序列如序列表Seq ID No：2所示。本发明的一种无油樟牻牛儿基牻牛儿基二磷酸合酶基因AtriGGPPS1编码的无油樟GGPPS1蛋白可用于无油樟萜类物质代谢基因工程中。

公开(公告)号：CN117143881A

公开(公告)日：2023-12-01

申请号：CN202210571648.9

申请日：2022-05-24

Applicant: 南京大学

Inventor： 卢山 ,  孔梦娟 ,  景云鹤 ,  黄娜 ,  吕德新

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明发现了一个调节植物对干旱胁迫耐受性的新蛋白，具体涉及水稻基因DSF1(Os03g17140)及其编码蛋白质在培育水稻耐旱新品种方面的应用。该基因对水稻干旱胁迫处理存在明显响应，可调控水稻对干旱胁迫的耐受性。本发明通过对DSF1基因启动子序列分析发现，该基因启动子序列含有三个植物激素脱落酸(abscisic acid，ABA)响应元件ABRE，说明该基因可能参与ABA信号通路从而调控水稻对非生物胁迫的响应，在水稻抗逆方面具有很大的潜在应用价值。发明人通过CRISPR/Cas9技术对水稻基因DSF1功能进行沉默，发现突变体提高了水稻对干旱胁迫的耐受性。通过将水稻中DSF1基因功能沉默，可以获得水稻耐旱转基因新品种，本发明为培育抗旱转基因作物新品种提供了理论基础。