公开(公告)号：CN117965428A

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202410226339.7

申请日：2024-02-29

Applicant: 南京医科大学第二附属医院

Inventor： 江蕾 ,  王璐璐 ,  王海燕

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明提供了一种小鼠肾足细胞的分离方法，属于细胞生物学技术领域。本发明将小鼠肾脏剪碎、使用酶消化液A进行第一消化，使用差异过筛法提取肾小球；将肾小球离心、使用酶消化液B进行第二消化，组织分离，重悬得到单细胞悬液；将单细胞悬液和生物素化抗体混合、孵育，离心，使用缓冲液2重悬，加入免疫磁珠孵育，使用缓冲液1清洗、磁分离后得到磁珠结合的细胞；将磁珠结合的细胞在缓冲液3中重悬，加入释放缓冲液孵育，释放，收集得到小鼠肾足细胞。本发明分离方法最终提取获得的肾足细胞纯度为99.6％，传统差异过筛结合酶消化法得到的肾足细胞纯度为96％，相对于现有技术，本发明磁珠提取肾足细胞法所提取到的肾足细胞纯度高，收率高。

公开(公告)号：CN110412293A

公开(公告)日：2019-11-05

申请号：CN201910722404.4

申请日：2019-08-06

Applicant: 南京医科大学第二附属医院

Inventor： 杨俊伟 ,  周阳 ,  秦楠 ,  徐玲玲 ,  江蕾 ,  曹红娣 ,  熊明霞 ,  闻萍

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/543 ,  G01N15/10 ,  G01N21/78 ,  G01N21/31

Abstract: 本发明公开了一种尿液中近端肾小管来源exosome含量的检测方法，包括以下步骤：S1，制备尿液exosome悬液；S2，测定尿液exosome悬液中蛋白浓度；S3，分选尿液exosome悬液中近端肾小管来源exosome；S4，对S3中分选出的尿液中近端肾小管来源的exosome进行检测。本发明采用超速离心方法获得高纯度的尿液exosome，再采用免疫磁珠吸附exosome，克服了exosome体积小的问题，增加了流式细胞仪方法检测exosome的可行性；采用CD63和CD13免疫标记方法分选尿液中近端小管来源的exosome，并用于后续对尿液中近端肾小管来源exosome含量进行准确检测分析。

公开(公告)号：CN108614119A

公开(公告)日：2018-10-02

申请号：CN201810368647.8

申请日：2018-04-23

Applicant: 南京医科大学第二附属医院

Inventor： 杨俊伟 ,  周阳 ,  曹红娣 ,  熊明霞 ,  江蕾 ,  闻萍 ,  方丽 ,  何伟春 ,  叶红

IPC: G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种尿液exosome的蛋白标记物的检测方法，该方法包括：从新鲜收集的尿液中提取并纯化exosome，收集沉淀并重悬得到exosome悬液；分别用CD13和podocalyxin包被的磁珠对步骤(1)得到的exosome悬液进行分选，得到exosome分选液；将分选液通过用BCA试剂盒测exosome的蛋白浓度；根据蛋白浓度，将各分选液制备为蛋白上样标本，将标本进行CD13、Podocalyxcin和CD63westernblot检测后，鉴定得到所需的蛋白标记物。本发明能够分别提取尿液中podocalyxin和CD13阳性的exosome，有助于进一步对其开展分析和检测，从而精准的反映疾病状态下足细胞和近端肾小管上皮细胞的变化，为疾病诊治提供生物标志物。

公开(公告)号：CN119174766A

公开(公告)日：2024-12-24

申请号：CN202411551232.6

申请日：2024-11-01

Applicant: 南京医科大学第二附属医院

Inventor： 王璐璐 ,  王星月 ,  江蕾 ,  戴春笋

IPC: A61K31/506 ,  A61P3/10 ,  A61P13/12

Abstract: 本发明涉及医药技术领域。本发明提供了尼洛替尼在制备治疗糖尿病肾病药物、治疗足细胞损伤药物中的应用。本发明所述尼洛替尼通过抑制ZAKα磷酸化，可下调P38磷酸化，JNK磷酸化的表达，显著降低尿微量白蛋白/肌酐比值水平，显著增加WT1阳性细胞数，缓解DKD足细胞损伤，达到治疗糖尿病肾病的效果。