公开(公告)号：CN110940647A

公开(公告)日：2020-03-31

申请号：CN201911085038.2

申请日：2019-11-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 许媛媛 ,  邵营格 ,  杨雅枝

IPC: G01N21/64 ,  B82Y40/00 ,  B82Y30/00

Abstract: 本发明属于分析化学技术领域，涉及一种基于氧化石墨烯(GO)纳米靶向载体复合物的Caspase-3荧光检测方法。本发明主要是在GO表面修饰靶向识别分子和荧光素(FAM)标记的Caspase-3特异识别肽段制备GO纳米靶向载体复合物，Caspase-3会引起底物肽段被切割FAM从GO表面脱落荧光恢复。实验用FAM标记的Caspase-3特异性底物肽(Pep)、壳聚糖(CS)和Toll样受体4抗体蛋白(Anti-TLR4)共价修饰于GO表面，构建用于凋亡关键节点蛋白Caspase-3检测的GO纳米靶向载体复合物(GO/CS/Pep/Anti-TLR4)；Caspase-3存在时会识别GO/CS/Pep/Anti-TLR4上Pep含有的序列肽段并特异性切割，FAM从GO表面脱落荧光恢复，通过荧光分光光度计检测荧光强度，绘制Caspase-3浓度与荧光强度之间的标准关系曲线，依据检测所得荧光强度计算实际样品中Caspase-3浓度。该方法灵敏性高、特异性强。