一种绵羊VASA基因报告载体的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN116790662A

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202310501774.1

    申请日:2023-05-06

    Abstract: 本发明公开了一种绵羊VASA基因报告载体的构建方法及其应用,本发明的目的是利用CRISPR/Cas9技术,构建VASA基因的报告载体,并利用CRISP/dCas9系统在成纤维细胞验证敲入载体的有效性。本发明载体的构建方法是:①构建EGFP‑PGK puro‑VASA报告载体;②基于VASA基因外显子序列设计靶向gRNA序列,并构建Cas9‑gRNA敲入载体,共同进行成纤维细胞转染;③利用CRISPR/dCas9激活系统激活VASA基因表达。本发明的载体可以在体外细胞中进行有效性验证。通过本发明,可以实现外源基因VASA在绵羊成纤维细胞中的激活表达,为进一步探索生殖特异性基因的功能提供研究基础。

    亚精胺在绵羊精液冷冻保存中的应用

    公开(公告)号:CN117918336A

    公开(公告)日:2024-04-26

    申请号:CN202410080428.5

    申请日:2024-01-19

    Abstract: 本发明公开了亚精胺在绵羊精液冷冻保存中的应用,在精液冷冻基础稀释液中添加亚精胺得到绵羊精液冷冻保护剂用于绵羊精液的冷冻保存。研究表明,经过亚精胺的处理,冷冻保存的绵羊精液的活力和运动性能得到了显著改善,活性氧水平(ROS)也有所降低,线粒体膜电位以及能量代谢也有所提高,抗氧化能力也有所增强,有助于提升绵羊精子的活力和提高线粒体自噬来维持线粒体功能。本研究为建立绵羊精液冷冻保存技术提供了关键技术支持,对于绵羊的繁殖和种群扩繁具有重大的现实意义。

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