公开(公告)号：CN1277261A

公开(公告)日：2000-12-20

申请号：CN00107831.3

申请日：2000-06-23

Applicant: 南京农业大学 ,  成都瑞盛高科技有限责任公司

Inventor： 吉传义 ,  杜念兴 ,  朱杰青 ,  龚光明 ,  王凌 ,  龚晓明

IPC: C12N15/13 ,  C12N15/63 ,  C12N15/64 ,  C12N15/70 ,  A61K39/395

Abstract: 本发明动物去势疫苗基因及基因工程体,用于生产家畜家禽去势基因工程亚单位疫苗,属于生物技术高科技领域。其方法如下:人工合成畜用、禽用或畜禽通用的LHRH基因片段,其5’端和3’端分别加有NcoI和XhoI酶切位点,插入pET－32c质粒,构建成4种表达LHRH－Trx融合蛋白的pET－32cLHRHn－N/X重组质粒。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),表达产物可为溶性蛋白,便于提取纯化,家畜、家禽通用,免疫鸡、猪、羊、兔、犬、猫等动物,可有效去势。图为重组质粒pET－32cLHRHn(L1、L2、L3、L4)－N/X的构建。

公开(公告)号：CN1267724A

公开(公告)日：2000-09-27

申请号：CN00107295.1

申请日：2000-05-09

Applicant: 南京农业大学 ,  中牧实业股份有限公司成都药械厂

Inventor： 杜念兴 ,  杨宏 ,  吉传义 ,  龚文波 ,  徐文忠 ,  王林云 ,  申咏红 ,  黄吉风 ,  张益民 ,  杨京平 ,  李汝俭

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/12 ,  C12N15/62 ,  C12N15/863 ,  A61K39/42

Abstract: 本发明生长抑素基因工程体及其活载体疫苗,属于生物技术高科技研究领域。将合成的SS基因连接于乙肝表面抗原(HBsAg)基因上,构建成HBs/ss融合基因。然后将其克隆到痘苗病毒表达载体(pGJP－5)中,与痘苗病毒同源重组,筛选出能表达HBsAg/ss融合蛋白的重组痘苗病毒(vv-HBs/ss)。将此基因工程体在鸡胚绒毛尿膜上增殖后,制成生长抑素基因工程活载体疫苗。经农业部审批为安全等级Ⅰ级,同意进行中间试验。试验结果表明,本疫苗生产工艺简便,不造成环境污染,免疫猪、牛、羊等家畜安全有效。于1999年月12月经农业部审批。同意在川、苏2省商品化生产(农基安审定99B－03—09)。

公开(公告)号：CN1273127A

公开(公告)日：2000-11-15

申请号：CN00105675.1

申请日：2000-04-17

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 杜念兴 ,  刘永庆 ,  赵国屏 ,  成志恒 ,  陈溥言

IPC: A61K39/02 ,  A61K38/16 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明用于生产生长抑素(SS)亚单位疫苗的基因工程体,属于生物技术高科技研究领域。工程体的获得方案如下:先合成两端含有Kph I(K)和Ps tI(P)酶切位点的SS基因,将其插入pThioHis A质粒的相应位点,构建成SS－K/P质粒,转化感受态大肠杆菌后,获得能表达SS融合蛋白的系列工程菌。本发明选择表达系统和最佳的插入位点是技术关键,采用了pThioHis、PET32和PT7Za 3个大肠杆菌高效表达系统,每个系统用2个插入位点,共构建6个可供选择的工程菌。进一步研制了适用于多次免疫的SS基因工程业单位苗。分别免疫小鼠和免疫妊娠母猪等做实验小试;结果比对照提高18—36.9%。