黄瓜幼叶黄化基因的分子标记方法

    公开(公告)号:CN106957897B

    公开(公告)日:2020-12-08

    申请号:CN201610017929.4

    申请日:2016-01-12

    Abstract: 本发明公开了黄瓜幼叶黄化基因连锁的分子标记方法,属于生物技术领域。首次公开了与黄瓜幼叶黄化基因紧密连锁的分子标记SSR63,该标记正反向引物序列分别为:5′GCCTTCATCCTGTGGCGT 3′和5′CCAGTCATGGGTTTGTTGGA 3′。在幼叶黄化与绿叶黄瓜构建的F2中,引物SSR63F/SSR63R在幼叶黄化株系中均能扩增出226bp产物,在绿叶株系中均能扩增出204bp产物或同时含有204bp和226bp两条带的产物,与vyl紧密连锁。本发明公开的与黄瓜幼叶黄化基因vyl紧密连锁分子标记,可用于黄瓜幼叶黄化基因定位或分子标记辅助育种。

    黄瓜-酸黄瓜异附加系材料的鉴定方法

    公开(公告)号:CN107326068A

    公开(公告)日:2017-11-07

    申请号:CN201710345914.5

    申请日:2017-05-11

    CPC classification number: C12Q1/6841 A01H1/02 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明公开了黄瓜-酸黄瓜异附加系材料的鉴定方法。将甜瓜属双二倍体新种与二倍体黄瓜正反杂交获得的甜瓜属异源三倍体与二倍体栽培黄瓜进行回交,获得黄瓜-酸黄瓜异附加系候选材料。将黄瓜着丝粒特异的重复序列Type III标记探针。取黄瓜-酸黄瓜异附加系候选材料根尖进行酶解,火焰干燥法制片,获得分散度良好的中期染色体制片。将黄瓜着丝粒特异重复序列Type III探针变性后杂交到变性的中期染色体制片上,利用高严谨度的杂交条件,使得Type III产生清晰可辨的荧光信号,从而鉴定出黄瓜-酸黄瓜异附加系材料及其附加酸黄瓜染色体的数目。本发明黄瓜-酸黄瓜异附加系材料的鉴定方法,为异附加系材料中野生酸黄瓜优异基因的转移,培育黄瓜新品种创造了条件。

    黄瓜幼叶黄化基因的分子标记方法

    公开(公告)号:CN106957897A

    公开(公告)日:2017-07-18

    申请号:CN201610017929.4

    申请日:2016-01-12

    Abstract: 本发明公开了黄瓜幼叶黄化基因连锁的分子标记方法,属于生物技术领域。首次公开了与黄瓜幼叶黄化基因紧密连锁的分子标记SSR63,该标记正反向引物序列分别为:5′GCCTTCATCCTGTGGCGT 3′和5′CCAGTCATGGGTTTGTTGGA 3′。在幼叶黄化与绿叶黄瓜构建的F2中,引物SSR63F/SSR63R在幼叶黄化株系中均能扩增出226bp产物,在绿叶株系中均能扩增出204bp产物或同时含有204bp和226bp两条带的产物,与vyl紧密连锁。本发明公开的与黄瓜幼叶黄化基因vyl紧密连锁分子标记,可用于黄瓜幼叶黄化基因定位或分子标记辅助育种。

    黄瓜6号染色体探针的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN104593508A

    公开(公告)日:2015-05-06

    申请号:CN201510040811.9

    申请日:2015-01-23

    Abstract: 本发明公开了黄瓜6号染色体探针制备的方法和应用。它是基于黄瓜基因组序列,通过RepeatMasker软件和黄瓜基因组数据库BLAST分析选取不含重复序列的DNA序列,利用Primer Premier 5.0软件进行引物设计。通过PCR扩增获得覆盖单染色体的PCR产物,将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳纯化,利用核酸浓度测量仪测定浓度后,将每对引物等量的产物进行混池,并用缺刻平移法标记探针,并利用荧光原位杂交技术杂交到染色体制片上,完成单染色体探针的制备和检测应用。通过应用此方法,可以快速获得黄瓜单染色体或者任何染色体区段的探针,可对单染色体或任何染色体的形态结构进行精确的分析研究。

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