公开(公告)号：CN118459552A

公开(公告)日：2024-08-09

申请号：CN202410607446.4

申请日：2024-05-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 华修德 ,  李姣 ,  尤天阳 ,  陆阳 ,  王鸣华

IPC: C07K7/08 ,  C07K16/44 ,  C12N15/11 ,  G01N33/53 ,  G01N33/58 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种与高效氟吡甲禾灵免疫复合物特异性结合的多肽，以及所述多肽在高效氟吡甲禾灵免疫检测中的应用。本发明利用高效氟吡甲禾灵单克隆抗体与高效氟吡甲禾灵形成的免疫复合物，从噬菌体展示随机多肽库中淘选出特异性结合的多肽，通过ELISA和一代测序，获得了阳性克隆及其多肽序列。基于最佳的多肽所建立非竞争噬菌体ELISA的半饱和浓度为1.83ng/mL，高于目前所报道的高效氟吡甲禾灵免疫检测方法。可用于快速、灵敏、低成本、高特异性地检测环境和农产品中高效氟吡甲禾灵残留。

公开(公告)号：CN113698394B

公开(公告)日：2023-12-15

申请号：CN202111125286.2

申请日：2021-09-24

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 华修德 ,  王鸣华 ,  李姣 ,  丁园 ,  陈贺

IPC: C07D405/06 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/577 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种丙环唑半抗原及其制备方法和应用。丙环唑半抗原采用从头合成法，在丙环唑的苯环上连接含有4个C原子的连接臂，并在连接臂末端引入可以和载体蛋白偶联的羧基基团。利用该半抗原制备的单克隆抗体灵敏度高，特异性强。用间接竞争酶联免疫测定(ic‑ELISA)的方法测得其灵敏度(IC50)为2.33μg/L，检测范围(IC10‑IC90)为0.26‑21.28μg/L。该单克隆抗体与丙环唑类似物均无交叉反应(CR＜0.1％)。此外，利用该单克隆抗体制备了检测灵敏度高、特异性强、简便快速、成本低的丙环唑胶体金快速检测试纸条。该试纸条可用于检测农产品中丙环唑的残留，其检测限达5μg/L。

公开(公告)号：CN118388595A

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202410607463.8

申请日：2024-05-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 华修德 ,  李姣 ,  丁园 ,  崔盼盼 ,  王鸣华

IPC: C07K7/06 ,  C07K16/44 ,  C12N15/11 ,  G01N33/53 ,  G01N33/577 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种与丙环唑免疫复合物特异性结合的多肽，以及所述多肽在丙环唑免疫检测中的应用。本发明利用丙环唑单克隆抗体与丙环唑形成的免疫复合物，从噬菌体展示随机多肽库中淘选出特异性结合的多肽，通过ELISA和一代测序，获得了阳性克隆及其多肽序列。基于最佳的多肽所建立非竞争噬菌体ELISA的半饱和浓度为0.06ng/mL，高于目前所报道的丙环唑免疫检测方法。可用于快速、灵敏、低成本、高特异性地检测环境和农产品中丙环唑残留。

公开(公告)号：CN117903256A

公开(公告)日：2024-04-19

申请号：CN202311255443.0

申请日：2023-09-26

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 华修德 ,  黄联润 ,  丁园 ,  王鸣华 ,  李姣

IPC: C07K7/64 ,  G01N33/53 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种能够与二甲戊灵单克隆抗体特异性结合的噬菌体展示多肽，以及所述多肽在二甲戊灵免疫检测中的应用。本发明从噬菌体随机展示多肽库中淘选出了两种能够与二甲戊灵单克隆抗体特异性结合的噬菌体多肽。利用所得到的多肽和二甲戊灵单克隆抗体可建立竞争型酶连免疫吸附分析方法，经过优化，方法的半抑制浓度可达3.77ng/mL。该多肽可以通过固相合成技术被制备为无噬菌体载体的多肽，能够与二甲戊灵单克隆抗体建立免疫层析分析方法。该免疫层析分析方法的灵敏度相较于使用化学半抗原所建立的免疫层析分析方法提高两倍，最低检测浓度为5ng/mL。本发明为二甲戊灵免疫检测技术的开发提供了一种高灵敏度，实用可靠的竞争试剂。

公开(公告)号：CN113698394A

公开(公告)日：2021-11-26

申请号：CN202111125286.2

申请日：2021-09-24

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 华修德 ,  王鸣华 ,  李姣 ,  丁园 ,  陈贺

IPC: C07D405/06 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/577 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种丙环唑半抗原及其制备方法和应用。丙环唑半抗原采用从头合成法，在丙环唑的苯环上连接含有4个C原子的连接臂，并在连接臂末端引入可以和载体蛋白偶联的羧基基团。利用该半抗原制备的单克隆抗体灵敏度高，特异性强。用间接竞争酶联免疫测定(ic‑ELISA)的方法测得其灵敏度(IC50)为2.33μg/L，检测范围(IC10‑IC90)为0.26‑21.28μg/L。该单克隆抗体与丙环唑类似物均无交叉反应(CR＜0.1％)。此外，利用该单克隆抗体制备了检测灵敏度高、特异性强、简便快速、成本低的丙环唑胶体金快速检测试纸条。该试纸条可用于检测农产品中丙环唑的残留，其检测限达5μg/L。