公开(公告)号：CN117363562A

公开(公告)日：2024-01-09

申请号：CN202311518543.8

申请日：2023-11-15

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 黄赞 ,  朱海宁 ,  秦静 ,  宋明媚 ,  朱伟云 ,  毛胜勇 ,  刘军花

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种羊科小肠类器官培养基，在Advanced DMEM/F12培养基中添加N2补充剂、B27血清替代物、N‑乙酰半胱氨酸、烟酰胺、A83‑01、SB202190、Y27632、HEPES、GlutaMax、青链霉素混合液、Wnt3a、R‑spondin1条件培养基、Noggin、EGF配制而成。同时，公开了使用羊科小肠类器官培养基进行培养的方法。本发明培养基可促进羊科小肠各个肠段隐窝中的干细胞增殖分化，在体外形成类器官；还具有所用生长因子少、成本低、一致性高的优点。

公开(公告)号：CN117568260A

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202311418186.8

申请日：2023-10-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 黄赞 ,  朱海宁 ,  秦静 ,  宋明媚 ,  刘军花 ,  毛胜勇

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种羊科动物瘤胃上皮类器官干细胞培养基，采用体积百分比为50％的L‑WRN条件培养液，每100ml培养液加入以下组分：1ml N2补充剂、1ml B27补充剂、10mM烟酰胺、1.25mM N‑乙酰半胱氨酸、10μM SB202190、10μM Y‑27632、500nM A83‑01。在促进瘤胃上皮发生角化时，额外加入5mM丁酸钠。并公开了利用该培养基进行羊科动物瘤胃上皮类器官干细胞培养的方法。本发明可以从羊科动物瘤胃上皮中消化获得干细胞，将其体外培养为具有复层鳞状上皮典型特征的瘤胃上皮类器官；得到的绵羊科和山羊科瘤胃上皮类器官可连续传代，且具有明显瘤胃上皮细胞分层，角化显著。