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公开(公告)号：CN112005968A
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN202010911812.7
申请日：2020-09-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01K67/027 , C12N15/89
Abstract: 本发明提供了一种半乳糖基转移酶GalT基因点突变小鼠模型的构建方法及其用途，包括如下步骤：（1）靶点构建：寻找半乳糖基转移酶B4GalT基因的CDS区，明确外显子部分，确定基因突变位点；（2）获取受精卵，并进行显微注射：通过体外转录的方式，获得cas9 mRNA和gRNA，通过合成获得oligo donor DNA，将cas9 mRNA、gRNA和oligo donor DNA显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，获得F0代小鼠；（3）将阳性F0代小鼠和C57BL/6J配繁后，得到具有B4GalT基因定点突变的阳性F1代杂合子；（4）阳性杂合子小鼠交配后经PCR测序确认获得阳性纯合子，表明小鼠模型构建成功。本发明模型制作简单，重复性好，可用于人类糖基化异常疾病的药物的研究，对探求治疗方法有重要的实际意义。
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