公开(公告)号：CN107557301A

公开(公告)日：2018-01-09

申请号：CN201710961366.9

申请日：2017-10-17

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 孙锦 ,  刘铭铭 ,  薄宇 ,  郭世荣 ,  仇紫岩 ,  孔镭

IPC: C12N1/04 ,  C12N1/02 ,  C12N3/00 ,  C12N11/10 ,  C12N11/02 ,  C12N11/08 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供了一种丛枝菌根真菌的保藏方法，属于微生物保藏技术领域。其的在于解决现有技术费时、费力、需要较大的空间和温室条件或操作步骤繁琐，成本较高等问题。本发明方法，包括以下步骤：1)采用湿筛倾析法和蔗糖离心法从盆栽扩繁菌剂中分离得到丛枝菌根真菌孢子，消毒后制得丛枝菌根真菌孢子悬浮液；2)以海藻酸钠、明胶、卡拉胶和聚乙烯醇作为载体，将上述孢子悬浮液包埋到载体中得到菌剂混合物；3)将菌剂混合物通过物理挤压方式滴入无菌交联剂中制成球状物，固化清洗后得到丛枝菌根真菌包埋小珠；4)将包埋小珠干燥后装入离心管，放置在4℃冰箱中保藏。本发明方法操作简单，成本低廉，不需要占用大量空间，节省物力和人力。

公开(公告)号：CN109207367A

公开(公告)日：2019-01-15

申请号：CN201811221229.2

申请日：2018-10-19

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 孙锦 ,  孔镭 ,  刘铭铭 ,  王战 ,  宫筱雯 ,  张晓琳 ,  杨雅兰

IPC: C12N1/04 ,  C12N3/00 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供了一种丛枝菌根真菌的简易保存方法，属于微生物保存技术领域。本发明提供的丛枝菌根真菌保存方法，包括以下步骤：1)采用湿筛倾析法和蔗糖离心法从盆栽扩繁菌剂中分离得到丛枝菌根真菌孢子，制得丛枝菌根真菌孢子悬浮液；2)以甘油、甘油和生理盐水、海藻糖和蔗糖作为冷冻保护剂，分别与上述孢子悬浮液混合；3)将混合液装入10ml离心管中，再将离心管装入自封袋中并利用硅胶进行干燥；4)然后将离心管置于-20℃下预冻，最后置于-80℃下进行保存。本发明方法操作简单，成本低廉，菌种活性保存效果较好，能成功地与寄主植物根系建立菌根共生体。