公开(公告)号：CN107279497A

公开(公告)日：2017-10-24

申请号：CN201710585024.1

申请日：2017-07-18

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘军花 ,  毛胜勇 ,  朱伟云 ,  孙大明 ,  刘理想

IPC: A23K20/163 ,  A23K50/10 ,  A23K50/60

Abstract: 本发明公开了阿斯巴甜在促进动物小肠发育、增强小肠屏障功能中的应用；阿斯巴甜可以在幼龄反刍动物开食料中作为添加剂，通过甜味受体等一系列信号途径刺激GLP-2的分泌，之后与GLP-2R受体结合后，激活ERK1/2信号通路，从而促进紧密连接蛋白的表达，增强小肠上皮的屏障功能，通过调节幼龄反刍动物细胞周期蛋白和相关依赖性激酶的表达推动细胞周期进程促进小肠上皮的发育、增强小肠屏障功能，预防羔羊等幼龄反刍动物腹泻的发生，提高羔羊等幼龄反刍动物的成活率，有利于幼龄反刍动物断奶前期肠道健康，减弱断奶应激。

公开(公告)号：CN107261120A

公开(公告)日：2017-10-20

申请号：CN201710584958.3

申请日：2017-07-18

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘军花 ,  毛胜勇 ,  朱伟云 ,  孙大明 ,  刘理想

IPC: A61K38/26 ,  A61P1/00 ,  A61P1/12

CPC classification number: A61K38/26

Abstract: 本发明公开替度鲁肽在促进幼龄反刍动物小肠发育中的应用；本发明的替度鲁肽可以作为GLP-2替代物促进幼龄反刍动物小肠发育，替度鲁肽的氨基酸序列的第二个氨基酸为Gly，而GLP-2氨基酸序列的同等位置氨基酸为Ala，这个差异不但不会造成与GLP-2功能的差异，而且还会避免被GLP-2的降解物(二肽基肽酶Ⅳ)降解，持续高效的发挥作用。本发明通过注射替度鲁肽调节幼龄反刍动物细胞周期蛋白和相关依赖性激酶的表达推动细胞周期进程促进小肠上皮的发育、增强小肠屏障功能，从而防护肠道上皮屏障来预防羔羊等幼龄反刍动物腹泻的发生，提高羔羊等幼龄反刍动物的成活率，有利于幼龄反刍动物断奶前期肠道发育，减弱断奶应激。

公开(公告)号：CN109294972A

公开(公告)日：2019-02-01

申请号：CN201811208355.4

申请日：2018-10-17

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘军花 ,  孙大明 ,  毛胜勇 ,  朱伟云 ,  刘理想

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开一种羔羊小肠上皮细胞体外培养方法，包括如下步骤：组织采集、除菌、消化、清洗、收集、重悬、细胞接种、纯化、传代等过程。本发明改善反刍动物小肠上皮细胞体外培养方法，提供操作步骤简单、花费较低的羔羊小肠上皮细胞体外培养方法，易获得大量纯度较好、活力高、贴壁快的小肠上皮细胞，并且细胞被污染的情况大大降低，培养过程中均无发生细胞被污染的情况。普通小肠上皮细胞分离方法所得的细胞4天后贴壁细胞较少，细胞悬浮呈圆形；而本发明的小肠上皮细胞分离培养方法所得的细胞在4天后贴壁较多，细胞与细胞之间紧密相连、细胞形态呈单层“铺石路”和多角形生长。

公开(公告)号：CN109097320A

公开(公告)日：2018-12-28

申请号：CN201810811345.3

申请日：2018-07-23

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘军花 ,  刘理想 ,  毛胜勇 ,  朱伟云 ,  孙大明

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开一种绵羊羔羊瘤胃上皮细胞培养方法，包括如下步骤：获取羔羊瘤胃组织；钝性分离黏附的浆膜层和肌肉层；将瘤胃组织裁剪，用胰蛋白酶溶液消化，直至瘤胃上皮组织呈现粘性且乳头发白；用胰蛋白酶继续消化，收集细胞；把收集到的细胞沉淀清洗，用完全培养基重悬细胞后，接种于培养瓶中培养；换瓶培养，定期更换培养基，完成铺层，即培养所得的细胞为瘤胃上皮细胞。本发明对瘤胃上皮细胞分离培养进行改进，通过此法能有效获得活力高，贴壁早，生长快的瘤胃上皮细胞。普通消化分离方法所得的细胞接种后3～6d开始贴壁，8～10d完成铺层，而本发明的消化分离方法所得的细胞在2～3d开始贴壁，5～6d完成铺层。

公开(公告)号：CN107279497B

公开(公告)日：2020-04-21

申请号：CN201710585024.1

申请日：2017-07-18

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘军花 ,  毛胜勇 ,  朱伟云 ,  孙大明 ,  刘理想

IPC: A23K20/163 ,  A23K50/10 ,  A23K50/60

Abstract: 本发明公开了阿斯巴甜在促进动物小肠发育、增强小肠屏障功能中的应用；阿斯巴甜可以在幼龄反刍动物开食料中作为添加剂，通过甜味受体等一系列信号途径刺激GLP‑2的分泌，之后与GLP‑2R受体结合后，激活ERK1/2信号通路，从而促进紧密连接蛋白的表达，增强小肠上皮的屏障功能，通过调节幼龄反刍动物细胞周期蛋白和相关依赖性激酶的表达推动细胞周期进程促进小肠上皮的发育、增强小肠屏障功能，预防羔羊等幼龄反刍动物腹泻的发生，提高羔羊等幼龄反刍动物的成活率，有利于幼龄反刍动物断奶前期肠道健康，减弱断奶应激。