公开(公告)号：CN105838731B

公开(公告)日：2020-01-03

申请号：CN201610159897.1

申请日：2016-03-17

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 杨倩 ,  刘浩飞 ,  徐文雯 ,  朱立麒

IPC: C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/02 ,  A61K35/742 ,  A61P1/00 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明涉及能够合成30个碳原子(C30)的类胡萝卜素4，4′‑二脱辅基链孢红素(4，4’‑diaponeurosporene)重组枯草芽孢杆菌，属于生物技术基因工程领域。本发明成功构建了含有C30类胡萝卜素合成酶基因(crtm和crtn)的枯草芽孢杆菌表达质粒pMK3‑crtmn(能够在枯草芽孢杆菌中表达C30类胡萝卜素合成酶Crtm和Crtn)，并成功电击转化入枯草芽孢杆菌WB800中。转化后的WB800菌体由原来的白色变为黄色。提取重组WB800中的色素成分经高效液相色谱(HPLC)鉴定为4，4′‑二脱辅基链孢红素。4，4′‑二脱辅基链孢红素能够刺激树突状细胞成熟，产生的细胞因子(IL‑6、IL‑10、IL‑12p70和TNFα)量增加，并且具有更强的刺激T淋巴细胞增殖的能力。口服能够合成4，4′‑二脱辅基链孢红素的枯草芽孢杆菌可以显著降低葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎症状。这种能产4，4′‑二脱辅基链孢红素的枯草芽孢杆菌有望开发成为一种预防结肠炎的益生菌。

公开(公告)号：CN105838731A

公开(公告)日：2016-08-10

申请号：CN201610159897.1

申请日：2016-03-17

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 杨倩 ,  刘浩飞 ,  徐文雯 ,  朱立麒

IPC: C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/02 ,  A61K35/742 ,  A61P1/00 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明涉及能够合成30个碳原子(C30)的类胡萝卜素4，4′?二脱辅基链孢红素(4，4’?diaponeurosporene)重组枯草芽孢杆菌，属于生物技术基因工程领域。本发明成功构建了含有C30类胡萝卜素合成酶基因(crtm和crtn)的枯草芽孢杆菌表达质粒pMK3?crtmn(能够在枯草芽孢杆菌中表达C30类胡萝卜素合成酶Crtm和Crtn)，并成功电击转化入枯草芽孢杆菌WB800中。转化后的WB800菌体由原来的白色变为黄色。提取重组WB800中的色素成分经高效液相色谱(HPLC)鉴定为4，4′?二脱辅基链孢红素。4，4′?二脱辅基链孢红素能够刺激树突状细胞成熟，产生的细胞因子(IL?6、IL?10、IL?12p70和TNFα)量增加，并且具有更强的刺激T淋巴细胞增殖的能力。口服能够合成4，4′?二脱辅基链孢红素的枯草芽孢杆菌可以显著降低葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎症状。这种能产4，4′?二脱辅基链孢红素的枯草芽孢杆菌有望开发成为一种预防结肠炎的益生菌。