公开(公告)号：CN102584972A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210058590.4

申请日：2012-03-07

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 郭世荣 ,  阳燕娟 ,  孙锦 ,  严蓓 ,  何立中 ,  李斌

IPC: C07K14/415 ,  C07K1/28 ,  C07K1/26

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种去除植物叶片Rubisco，富集和分离剩余蛋白质的电泳方法。该方法先利用18％的PEG-4000去除西瓜叶片中的Rubisco，再通过TCA-丙酮沉淀法抽提剩余蛋白质，进行双向电泳分离西瓜叶片剩余蛋白质。与全蛋白质双向电泳图谱相比，采用18％PEG沉淀西瓜叶片Rubsico后，Rubsico的大小亚基大部分消失，剩余的蛋白点大部分表达量均上调，分离到的蛋白质增加了48.4％，在分子量小于25.0kDa的区域出现大量新的蛋白点(63±15个)，经反复实验证明，重复性好，图谱清晰，结果可靠。

公开(公告)号：CN102584972B

公开(公告)日：2015-08-26

申请号：CN201210058590.4

申请日：2012-03-07

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 郭世荣 ,  阳燕娟 ,  孙锦 ,  严蓓 ,  何立中 ,  李斌

IPC: C07K14/415 ,  C07K1/28 ,  C07K1/26

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种去除植物叶片Rubisco，富集和分离剩余蛋白质的电泳方法。该方法先利用18％的PEG-4000去除西瓜叶片中的Rubisco，再通过TCA-丙酮沉淀法抽提剩余蛋白质，进行双向电泳分离西瓜叶片剩余蛋白质。与全蛋白质双向电泳图谱相比，采用18％PEG沉淀西瓜叶片Rubsico后，Rubsico的大小亚基大部分消失，剩余的蛋白点大部分表达量均上调，分离到的蛋白质增加了48.4％，在分子量小于25.0kDa的区域出现大量新的蛋白点(63±15个)，经反复实验证明，重复性好，图谱清晰，结果可靠。