公开(公告)号：CN101348836A

公开(公告)日：2009-01-21

申请号：CN200810198303.3

申请日：2008-08-31

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  朱雅楠 ,  张星 ,  王周

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/06 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种硝化细菌16SrDNA的荧光原位杂交检测方法，该方法先对玻片进行处理，然后对样品采集及预处理，再进行杂交，最后在荧光显微镜观察，计数硝化细菌菌体个数。其杂交是将NIT3探针用HEX标记，将CNIT3探针与标记荧光的NIT3探针与杂交液混合于载玻片上在杂交盒内进行杂交反应，杂交温度控制在46℃－48℃，杂交时间为2－3h，杂交后用洗脱液清洗探针。该发明可直接应用于硝化系统中硝化细菌的数量分布和空间分布的检测，直接指导了自然界以及人工条件下硝化细菌群落多样性的测定；大大提高了硝化细菌群落分布监测的精确度和时效性，本发明尤其适用于硝化细菌的荧光原位杂交。

公开(公告)号：CN101348836B

公开(公告)日：2011-07-20

申请号：CN200810198303.3

申请日：2008-08-31

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  朱雅楠 ,  张星 ,  王周

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/06 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种硝化细菌16SrDNA的荧光原位杂交检测方法，该方法先对玻片进行处理，然后对样品采集及预处理，再进行杂交，最后在荧光显微镜观察，计数硝化细菌菌体个数。其杂交是将NIT3探针用HEX标记，将CNIT3探针与标记荧光的NIT3探针与杂交液混合于载玻片上在杂交盒内进行杂交反应，杂交温度控制在46℃-48℃，杂交时间为2-3h，杂交后用洗脱液清洗探针。该发明可直接应用于硝化系统中硝化细菌的数量分布和空间分布的检测，直接指导了自然界以及人工条件下硝化细菌群落多样性的测定；大大提高了硝化细菌群落分布监测的精确度和时效性，本发明尤其适用于硝化细菌的荧光原位杂交。