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公开(公告)号：CN114908092B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202210513854.4
申请日：2022-05-12
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种长效、高强度的杂合启动子及其重组菌株和应用，属于生物技术领域。本发明是在天然启动子PDC1p的基础上，添加了Cat8与Adr1转录因子结合位点，获得杂合启动子；操作对象为酿酒酵母组成型启动子，它是合成生物学领域使用较广泛的调控工具，具有广泛的适用性。与PDC1p相比，杂合启动子的调控能力明显提升，尤其是在发酵后期的强度得到了显著增强，使得重组菌株的基因转录水平提升了22倍，发酵后期产物的比生产速率提高了3.2倍，显著地增加了目标产物(瓦伦西亚烯)的产量。因此，重组菌株能够在整个发酵周期持续生产瓦伦西亚烯，进一步提高了瓦伦西亚烯的产量，为目标化合物的高效合成提供了一种技术方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114908092A
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202210513854.4
申请日：2022-05-12
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种长效、高强度的杂合启动子及其重组菌株和应用，属于生物技术领域。本发明是在天然启动子PDC1p的基础上，添加了Cat8与Adr1转录因子结合位点，获得杂合启动子；操作对象为酿酒酵母组成型启动子，它是合成生物学领域使用较广泛的调控工具，具有广泛的适用性。与PDC1p相比，杂合启动子的调控能力明显提升，尤其是在发酵后期的强度得到了显著增强，使得重组菌株的基因转录水平提升了22倍，发酵后期产物的比生产速率提高了3.2倍，显著地增加了目标产物(瓦伦西亚烯)的产量。因此，重组菌株能够在整个发酵周期持续生产瓦伦西亚烯，进一步提高了瓦伦西亚烯的产量，为目标化合物的高效合成提供了一种技术方法。
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公开(公告)号：CN109337921B
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN201811019561.0
申请日：2018-09-03
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种构建酿酒酵母裂解工程菌的重组载体及其应用，属于生物技术领域。本发明的重组载体可以敲除酿酒酵母基因组中的SED1基因，得到的突变菌株在裂解酶Zymolyase作用下能使细胞快速裂解，释放细胞内物质至胞外。操作对象为酿酒酵母，具有广泛适用性。裂解过程中无需添加额外试剂，成本廉价。裂解时间短，2h可将细胞完全裂解，大大缩短了以往酿酒酵母细胞裂解的时间。操作简便，不需玻璃珠等繁琐步骤和配制复杂裂解液，只需一种简单的缓冲液，大大简化了实验流程。因此，可利用本发明的酿酒酵母裂解方法进行酶活检测、菌落PCR、质粒提取、蛋白鉴定和高通量筛选等，具有简易、快捷、廉价的优点，具有较广的应用前景。
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公开(公告)号：CN110117551B
公开(公告)日：2023-02-10
申请号：CN201910271558.6
申请日：2019-04-04
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种生产瓦伦西亚烯的酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用。该工程菌是通过将酵母基因组中全局抑制因子基因敲除和角鲨烯合成酶基因下调，表达瓦伦西亚烯合成酶和过表达HMG‑CoA还原酶，且优化瓦伦西亚烯合成酶启动子获得。本发明通过游离载体过表达代谢途径中的关键基因，提高瓦伦西亚烯合成途径中的代谢通量，优化酵母细胞工厂，再结合瓦伦西亚烯合成酶启动子的适配性研究，经培养优化得到的酿酒酵母工程菌实现了对瓦伦西亚烯的高效生产，瓦伦西亚烯细胞干重产量可达到124.40mg/g，具有广阔的工业应用前景，具有积极的经济和社会发展的意义。
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公开(公告)号：CN110117551A
公开(公告)日：2019-08-13
申请号：CN201910271558.6
申请日：2019-04-04
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种生产瓦伦西亚烯的酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用。该工程菌是通过将酵母基因组中全局抑制因子基因敲除和角鲨烯合成酶基因下调，表达瓦伦西亚烯合成酶和过表达HMG-CoA还原酶，且优化瓦伦西亚烯合成酶启动子获得。本发明通过游离载体过表达代谢途径中的关键基因，提高瓦伦西亚烯合成途径中的代谢通量，优化酵母细胞工厂，再结合瓦伦西亚烯合成酶启动子的适配性研究，经培养优化得到的酿酒酵母工程菌实现了对瓦伦西亚烯的高效生产，瓦伦西亚烯细胞干重产量可达到124.40mg/g，具有广阔的工业应用前景，具有积极的经济和社会发展的意义。
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公开(公告)号：CN109337921A
公开(公告)日：2019-02-15
申请号：CN201811019561.0
申请日：2018-09-03
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种构建酿酒酵母裂解工程菌的重组载体及其应用，属于生物技术领域。本发明的重组载体可以敲除酿酒酵母基因组中的SED1基因，得到的突变菌株在裂解酶Zymolyase作用下能使细胞快速裂解，释放细胞内物质至胞外。操作对象为酿酒酵母，具有广泛适用性。裂解过程中无需添加额外试剂，成本廉价。裂解时间短，2h可将细胞完全裂解，大大缩短了以往酿酒酵母细胞裂解的时间。操作简便，不需玻璃珠等繁琐步骤和配制复杂裂解液，只需一种简单的缓冲液，大大简化了实验流程。因此，可利用本发明的酿酒酵母裂解方法进行酶活检测、菌落PCR、质粒提取、蛋白鉴定和高通量筛选等，具有简易、快捷、廉价的优点，具有较广的应用前景。
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