公开(公告)号：CN114196714B

公开(公告)日：2023-09-29

申请号：CN202111302525.7

申请日：2021-11-04

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 陈庭坚 ,  王光远 ,  何传平 ,  刘家韵

IPC: C12P19/34 ,  C12N15/115 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶无模板合成含非天然碱基寡核苷酸链的方法及其应用。将引发链单链DNA、TdT反应缓冲液和醋酸镁溶液混合，为混合液1；混合液1中加入天然的脱氧核糖核苷酸、dTPT3TP、dTPT3TP衍生物或者dNaMTP中的一种，为混合液2；混合溶液2中加入TdT，为混合液3；混合液3孵育，热处理，使TdT失活，为混合液4；混合液4中加入上样缓冲液，加热处理，使寡核苷酸链完全变性，通过变性胶，分析TdT将非天然碱基添加到寡核苷酸链3’末端的效果。该方法偶联效率高，成本低，操作方便，副产物少，不产生污染性废物。所述寡核苷酸链在DNA末端标记、六碱基信息存储中具有潜在应用价值。

公开(公告)号：CN110320186A

公开(公告)日：2019-10-11

申请号：CN201910491793.4

申请日：2019-06-06

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 肖波涛 ,  谭波 ,  周楷 ,  熊厅 ,  吕婧淇 ,  刘家韵

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明属于显微测控和单分子力谱测量领域，涉及一种多通道流动腔及磁镊复合检测系统和方法。一种多通道流动腔，包括：a通道、b通道和c通道，各通道上分别设有一腔室，在a通道的腔室上构建微槽阵列，通过毛细管将b通道的腔室与a通道与c通道的前端连接，对每个腔室与通道进行圆滑顺接。本发明a通道的设计不仅可以研究换药过程单分子的初始构象和结合动力学，还可减少制样时间，大大提高研发效率；b通道的设计可实现构建多试剂反应发生室，从单分子角度观察不同试剂中目标药物分子的构象变化等药效特征；c通道的设计可以在3维空间操控单分子，也可结合荧光技术研究单分子在剪切力作用下的构象特征，模拟更复杂的生理环境。

公开(公告)号：CN114196714A

公开(公告)日：2022-03-18

申请号：CN202111302525.7

申请日：2021-11-04

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 陈庭坚 ,  王光远 ,  何传平 ,  刘家韵

IPC: C12P19/34 ,  C12N15/115 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶无模板合成含非天然碱基寡核苷酸链的方法及其应用。将引发链单链DNA、TdT反应缓冲液和醋酸镁溶液混合，为混合液1；混合液1中加入天然的脱氧核糖核苷酸、dTPT3TP、dTPT3TP衍生物或者dNaMTP中的一种，为混合液2；混合溶液2中加入TdT，为混合液3；混合液3孵育，热处理，使TdT失活，为混合液4；混合液4中加入上样缓冲液，加热处理，使寡核苷酸链完全变性，通过变性胶，分析TdT将非天然碱基添加到寡核苷酸链3’末端的效果。该方法偶联效率高，成本低，操作方便，副产物少，不产生污染性废物。所述寡核苷酸链在DNA末端标记、六碱基信息存储中具有潜在应用价值。

公开(公告)号：CN110320186B

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN201910491793.4

申请日：2019-06-06

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 肖波涛 ,  谭波 ,  周楷 ,  熊厅 ,  吕婧淇 ,  刘家韵

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明属于显微测控和单分子力谱测量领域，涉及一种多通道流动腔及磁镊复合检测系统和方法。一种多通道流动腔，包括：a通道、b通道和c通道，各通道上分别设有一腔室，在a通道的腔室上构建微槽阵列，通过毛细管将b通道的腔室与a通道与c通道的前端连接，对每个腔室与通道进行圆滑顺接。本发明a通道的设计不仅可以研究换药过程单分子的初始构象和结合动力学，还可减少制样时间，大大提高研发效率；b通道的设计可实现构建多试剂反应发生室，从单分子角度观察不同试剂中目标药物分子的构象变化等药效特征；c通道的设计可以在3维空间操控单分子，也可结合荧光技术研究单分子在剪切力作用下的构象特征，模拟更复杂的生理环境。

公开(公告)号：CN117586984A

公开(公告)日：2024-02-23

申请号：CN202211297381.5

申请日：2022-10-21

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 陈庭坚 ,  王光远 ,  马星雲 ,  汪杨铭 ,  向禹铭 ,  刘家韵 ,  柳耘 ,  陈雨晴

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12P19/34

Abstract: 本发明涉及具有RNA及XNA合成活性的Tth DNA聚合酶突变株与应用。所述突变株既能识别天然dNTPs底物，也能识别NTPs，2’‑F‑NTPs或部分2’‑OMe‑NTPs的非天然底物的Tth DNA聚合酶突变株。所述突变株包含V520A，N585S，I616E，E617G，D657N，L659M，E683V/K，E744Q，M749R组成的至少一个突变位点。本发明提供的一系列Tth DNA聚合酶突变株中，突变株ssTth M1‑7到ssTth M1‑10能够高效转录NTPs，2’‑F‑NTPs和部分2’‑OMe‑NTPs，与野生型相比，突变株的活性得到了显著提高。