公开(公告)号：CN104109711A

公开(公告)日：2014-10-22

申请号：CN201410201044.0

申请日：2014-05-13

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 肖性龙 ,  万松华 ,  余以刚 ,  吴晖 ,  李晓凤 ,  胡双芳

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/72 ,  C12R1/84 ,  C12R1/865 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2563/107

Abstract: 一种用于检测腐败酵母菌核苷酸片段的引物、探针及检测方法和试剂盒，所述的引物由上游引物Yeast F1和下游引物Fungus R1组成，所述的上游引物Yeast F1的碱基序列为GAAGAGTCGAGTTGTTTGGGAA，下游引物Fungus R1的碱基序列为TCCTTCCCTTTCAACAATTTCAC。所述探针的碱基序列为TGTACTTGTTCGCTATCGGTCTCTCGCC。本发明提供的引物和探针具有良好的灵敏度和特异性。本发明整个反应均在封闭的反应管内进行，避免了其他核酸检测方法易于形成气溶胶污染而造成假阳性结果；由于对PCR产物进行实时监测，大大节省了监测时间，节约了人力物力。

公开(公告)号：CN104109711B

公开(公告)日：2016-03-02

申请号：CN201410201044.0

申请日：2014-05-13

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 肖性龙 ,  万松华 ,  余以刚 ,  吴晖 ,  李晓凤 ,  胡双芳

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/72 ,  C12R1/84 ,  C12R1/865 ,  C12R1/645

Abstract: 一种用于检测腐败酵母菌核苷酸片段的引物、探针及检测方法和试剂盒，所述的引物由上游引物Yeast F1和下游引物Fungus R1组成，所述的上游引物Yeast F1的碱基序列为GAAGAGTCGAGTTGTTTGGGAA，下游引物Fungus R1的碱基序列为TCCTTCCCTTTCAACAATTTCAC。所述探针的碱基序列为TGTACTTGTTCGCTATCGGTCTCTCGCC。本发明提供的引物和探针具有良好的灵敏度和特异性。本发明整个反应均在封闭的反应管内进行，避免了其他核酸检测方法易于形成气溶胶污染而造成假阳性结果；由于对PCR产物进行实时监测，大大节省了监测时间，节约了人力物力。

公开(公告)号：CN104531676A

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201410764765.2

申请日：2014-12-11

Applicant: 华南理工大学 ,  中山出入境检验检疫局检验检疫技术中心

Inventor： 肖性龙 ,  胡双芳 ,  李蓉 ,  余以刚 ,  万松华

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种快速提取细菌DNA的方法，包括以下步骤:(1)扩增样品中的细菌数；(2)将样品进行低速离心使样品与菌液分离；(3)在分离后的上清液中加入5～10％体积分数的裂解液，煮沸10min，所述裂解液为用TE缓冲液配制的Triton X-100和Tween-20的混合液；(4)然后高速离心2min，上清即为DNA溶液。本发明通过裂解液和煮沸法相结合，能够达到快速提取DNA的目的。本发明具有操作步骤简单、耗时少、DNA裂解更充分、经济成本低等优点，满足现代微生物快速检测的需求。