公开(公告)号：CN116478960A

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310078804.2

申请日：2023-02-01

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐泽凌 ,  陈淑珍 ,  刘志晴 ,  张炼辉

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N9/12

Abstract: 本发明公开了一种用于基因编辑的组合物，所述组合物含有pImPaCas质粒(SEQ IDNO：11)、pImPaCR质粒(SEQ ID NO：19)和表达Tn7转座酶TnsABCD的质粒。本发明所述组合物采用Tn7转座系统将完整的I‑F型Cas蛋白编码基因簇和RED重组酶编码基因簇整合到细菌基因组中，接着将一个能够表达gRNA和携带了用于同源重组修复的供体序列的编辑质粒转入细菌实现基因编辑。本发明相较于现有技术，有效提高了表达I‑F型Cas蛋白编码基因簇和RED重组酶编码基因簇的稳定性，有望扩展I‑F型CRISPR‑Cas基因编辑技术的细菌宿主适用范围，为研究细菌基因功能提供了新的工具。

公开(公告)号：CN114574467B

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202210069861.X

申请日：2022-01-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐泽凌 ,  陈淑珍 ,  刘志晴 ,  徐梓锐 ,  张炼辉

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种基因表达调控系统及其应用。所述基因表达调控系统包含一种用于基因表达调控的质粒组合物，所述质粒组合物包含质粒1和质粒2，其中质粒1为表达核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示序列的质粒；质粒2为表达mini‑CRISPR的质粒，所述mini‑CRISPR含有靶标序列以及在靶标序列的5’端和3’端均有核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的序列。本发明提供的I‑F型CRISPR‑Cas双质粒系统能够准确识别并结合靶标基因的启动子区域，通过常规质粒转化即可实现对靶标基因转录表达的有效抑制。该系统在细菌基因功能研究中具有明显的简便性，同时在细菌生理学研究、代谢通路改造、天然化合物合成、药物靶点发现、新型药物开发、高通量筛选等方面都具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN114574467A

公开(公告)日：2022-06-03

申请号：CN202210069861.X

申请日：2022-01-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐泽凌 ,  陈淑珍 ,  刘志晴 ,  徐梓锐 ,  张炼辉

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种基因表达调控系统及其应用。所述基因表达调控系统包含一种用于基因表达调控的质粒组合物，所述质粒组合物包含质粒1和质粒2，其中质粒1为表达核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示序列的质粒；质粒2为表达mini‑CRISPR的质粒，所述mini‑CRISPR含有靶标序列以及在靶标序列的5’端和3’端均有核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的序列。本发明提供的I‑F型CRISPR‑Cas双质粒系统能够准确识别并结合靶标基因的启动子区域，通过常规质粒转化即可实现对靶标基因转录表达的有效抑制。该系统在细菌基因功能研究中具有明显的简便性，同时在细菌生理学研究、代谢通路改造、天然化合物合成、药物靶点发现、新型药物开发、高通量筛选等方面都具有广阔的应用前景。