公开(公告)号：CN114805537A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210447073.X

申请日：2022-04-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 郭霄峰 ,  赖艳琴 ,  陈桂娥 ,  刘思泽

IPC: C07K14/54 ,  C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种表达犬白介素6的重组质粒、稳定表达犬白介素6蛋白的细胞株及其制备方法和应用。本发明首先构建了表达犬白介素6的重组质粒，将所述重组质粒导入中国仓鼠卵巢细胞(CHO)，筛选得到稳定表达犬白介素6蛋白的细胞株，所述细胞株传代培养20次仍可稳定表达犬白介素6蛋白，且细胞株表达犬白介素6蛋白的能力不受冻存及复苏的影响；所述细胞株表达犬白介素6蛋白是将犬白介素6蛋白分泌至细胞上清，纯化更方便，所得纯化蛋白更接近天然蛋白分子，具备促进淋巴细胞增殖的生物活性，可作为佐剂增强疫苗的免疫效果。

公开(公告)号：CN114807226A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210481190.8

申请日：2022-05-05

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 郭霄峰 ,  陈桂娥 ,  马娇洁 ,  赖艳琴

IPC: C12N15/85 ,  C07K14/54 ,  C12N5/10 ,  A61K38/20 ,  A61P37/04

Abstract: 本发明提供了一种表达犬IL‑12的重组质粒及表达犬IL‑12蛋白的细胞株的制备方法和应用，本发明的重组质粒为连接有核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示基因片段的表达载体。本发明以含有IGK信号肽和His标签的核酸序列的基因片段与表达载体连接制备重组质粒，所述重组质粒导入哺乳动物细胞系并筛选得到高表达犬IL‑12蛋白的细胞株，本发明的高表达犬IL‑12蛋白的细胞株的蛋白表达量远高于未添加IGK信号肽的IL‑12基因片段制备的重组质粒导入哺乳动物细胞系并筛选得到高表达犬IL‑12蛋白的细胞株；本发明为获得高表达犬IL‑12蛋白提供了新的方法，也为犬IL‑12蛋白的进一步研究和利用提供了基础。