公开(公告)号：CN109652414A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201910099252.7

申请日：2019-01-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张建民 ,  陈政权

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/74 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C07K14/285 ,  C12R1/42

CPC classification number: C12N15/74 ,  C07K14/285 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明涉及构建一株表达副猪嗜血杆菌Omp26基因的猪霍乱减毒沙门菌重组菌株，通过选择Omp 26为外源基因，无抗性质粒pYA3493为载体，猪霍乱减毒沙门氏菌C500 asd基因缺失株为受体菌，构成Asd+平衡表达系统，其在无外源选择压力的条件下能稳定遗传asd基因，能克服以往外源基因不稳定遗传的问题，且该系统无任何抗生素基因的标记，不会产生生物安全问题，这为将其开发成安全高效的疫苗活载体奠定了基础；同时又能良好表达副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白Omp 26，其亦可作为研究副猪嗜血杆菌临床检测、流行病学调查和免疫检测的一个特殊蛋白，为后续猪霍乱-副猪嗜血杆菌二联疫苗研究提供基础设想。

公开(公告)号：CN109652413A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201910099243.8

申请日：2019-01-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张建民 ,  陈政权

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/74 ,  C12N15/66 ,  C12N9/02 ,  C12N1/21 ,  C12R1/42

CPC classification number: C12N9/0008 ,  C12N15/66 ,  C12N15/74

Abstract: 本发明涉及构建一株表达副猪嗜血杆菌GAPDH基因的猪霍乱减毒沙门菌重组菌株，利用猪霍乱沙门菌C500Δasd缺失株的平衡致死载体系统，将副猪嗜血杆菌的一个重要免疫原性基因GAPDH与宿主菌中pYA3493载体相连，从而构建出HPS-Sal重组疫苗菌株，该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌基因组上的asd基因，含有能在该菌株中表达asd基因和副猪嗜血杆菌GAPDH基因的重组质粒pYA-GAPDH，经检测表达效果良好，说明外膜蛋白GAPDH可作为之后研究副猪嗜血杆菌临床检测、流行病学调查和免疫检测的一个基础蛋白，并且由于载体和受体菌的特殊性为以后构建猪霍乱和副猪嗜血杆菌二联疫苗提供了基础设想。