公开(公告)号：CN101878756B

公开(公告)日：2013-08-07

申请号：CN200910194044.1

申请日：2009-11-20

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王新荣 ,  朱孝伟 ,  胡月清 ,  孔祥超 ,  钟填奎 ,  贾文慧

IPC: A01N1/02 ,  C12Q1/68 ,  G01N27/447

Abstract: 本发明公开了松褐天牛样本的保存方法及其体内松材线虫的快速检测方法。本发明将捕捉到的松褐天牛样本置于75％的酒精或-70℃冰箱中保存，最大限度地保存了松褐天牛携带的松材线虫的数量，本发明创建了上述保存状态的松褐天牛中松材线虫DNA模板制备技术，直接将松褐天牛成虫的中后胸气管组织进行冻融、裂解、离心后用于PCR扩增，扩增效率达到100％，加快了检测的速度，提高检测的准确度，达到了简易、快速、准确的检测目的。

公开(公告)号：CN101878756A

公开(公告)日：2010-11-10

申请号：CN200910194044.1

申请日：2009-11-20

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王新荣 ,  朱孝伟 ,  胡月清 ,  孔祥超 ,  钟填奎 ,  贾文慧

IPC: A01N1/02 ,  C12Q1/68 ,  G01N27/447

Abstract: 本发明公开了松褐天牛样本的保存方法及其体内松材线虫的快速检测方法。本发明将捕捉到的松褐天牛样本置于75％的酒精或-70℃冰箱中保存，最大限度地保存了松褐天牛携带的松材线虫的数量，本发明创建了上述保存状态的松褐天牛中松材线虫DNA模板制备技术，直接将松褐天牛成虫的中后胸气管组织进行冻融、裂解、离心后用于PCR扩增，扩增效率达到100％，加快了检测的速度，提高检测的准确度，达到了简易、快速、准确的检测目的。

公开(公告)号：CN101586160A

公开(公告)日：2009-11-25

申请号：CN200910040391.9

申请日：2009-06-19

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王新荣 ,  胡月清 ,  孔祥超 ,  贾文慧 ,  朱孝伟 ,  钟填奎 ,  纪春艳

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种马尾松病死木中松材线虫的特异性检测引物、检测方法及其应用，该特异性检测引物其上游引物的核苷酸序列如SEQID NO：1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明的引物能将松材线虫与马尾松松木、马尾松木中其他12种线虫，以及马尾松木中常见的4种真菌和10种细菌区别开来。本发明还提供一种无需从病木中分离松材线虫，直接对病木中松材线虫进行PCR扩增的方法，将病木液氮研磨后，经WLB和蛋白酶K两次裂解，纯化后得到PCR扩增用DNA模板，扩增效率达到100％，节省了分离时间，提高了检测效率。本发明的检测方法简单高效，准确性高、特异性高，可制备成试剂盒进行大规模推广。