公开(公告)号：CN115825444B

公开(公告)日：2025-05-09

申请号：CN202210910335.1

申请日：2022-07-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 黄晓 ,  谭惠琼 ,  罗娜 ,  李发强

IPC: G01N33/68 ,  G01N21/64 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明通过一种基于烟草瞬时表达体系快速鉴定植物细胞自噬相关蛋白的方法和试剂盒。构建表达GFP荧光标记的ATG8a蛋白的农杆菌和表达mCherry荧光标记的待测蛋白的农杆菌，将所述农杆菌配置成悬浮液，混合后注入烟草叶片背面，培养烟草至有GFP荧光标记的ATG8a蛋白和mCherry荧光标记的待测蛋白表达；再注入刀豆素A，取烟草叶片在无菌湿润滤纸中培养，观测烟草叶片细胞液泡中待测蛋白表达情况。本方法用于在较短时间内达到精确、有效地鉴定植物细胞自噬相关蛋白，且鉴定出拟南芥的内甘露糖苷酶为自噬蛋白，所述拟南芥的内甘露糖苷酶的TAIR数据库编号为AT1G09010。

公开(公告)号：CN115825444A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202210910335.1

申请日：2022-07-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 黄晓 ,  谭惠琼 ,  罗娜 ,  李发强

IPC: G01N33/68 ,  G01N21/64 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明通过一种基于烟草瞬时表达体系快速鉴定植物细胞自噬相关蛋白的方法和试剂盒。构建表达GFP荧光标记的ATG8a蛋白的农杆菌和表达mCherry荧光标记的待测蛋白的农杆菌，将所述农杆菌配置成悬浮液，混合后注入烟草叶片背面，培养烟草至有GFP荧光标记的ATG8a蛋白和mCherry荧光标记的待测蛋白表达；再注入刀豆素A，取烟草叶片在无菌湿润滤纸中培养，观测烟草叶片细胞液泡中待测蛋白表达情况。本方法用于在较短时间内达到精确、有效地鉴定植物细胞自噬相关蛋白，且鉴定出拟南芥的内甘露糖苷酶为自噬蛋白，所述拟南芥的内甘露糖苷酶的TAIR数据库编号为AT1G09010。