公开(公告)号：CN114507288A

公开(公告)日：2022-05-17

申请号：CN202210271305.0

申请日：2022-03-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  李家冬 ,  吴广培 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  肖治理 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/53 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用。本发明通过噬菌体展示及生物淘筛技术对抗喹硫磷纳米抗体进行了亲和力成熟，获得了一种对喹硫磷亲和力相较野生型纳米抗体更高的纳米抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体能够特异性识别喹硫磷农药，相比原来的纳米抗体灵敏度提高了18％，最低检测限降低了25％；将本发明提供的纳米抗体用于检测喹硫磷农药的酶联免疫分析方法中，其IC50为18.62ng/mL，最低检测限为1.93ng/mL，线性范围为5.14‑67.45ng/mL，该方法的检测结果准确、灵敏度更高、效果好、稳定性好，可以更加广泛的应用于喹硫磷农药残留的检测。

公开(公告)号：CN114507288B

公开(公告)日：2023-09-19

申请号：CN202210271305.0

申请日：2022-03-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  李家冬 ,  吴广培 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  肖治理 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/53 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用。本发明通过噬菌体展示及生物淘筛技术对抗喹硫磷纳米抗体进行了亲和力成熟，获得了一种对喹硫磷亲和力相较野生型纳米抗体更高的纳米抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体能够特异性识别喹硫磷农药，相比原来的纳米抗体灵敏度提高了18％，最低检测限降低了25％；将本发明提供的纳米抗体用于检测喹硫磷农药的酶联免疫分析方法中，其IC50为18.62ng/mL，最低检测限为1.93ng/mL，线性范围为5.14‑67.45ng/mL，该方法的检测结果准确、灵敏度更高、效果好、稳定性好，可以更加广泛的应用于喹硫磷农药残留的检测。

公开(公告)号：CN114702592B

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN202210271306.5

申请日：2022-03-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  李家冬 ,  吴广培 ,  徐振林 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  G01N33/543 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种识别喹硫磷农药的纳米抗体及酶联免疫分析方法。本发明首先构建了一种噬菌体展示纳米抗体文库，并从噬菌体展示纳米抗体文库中筛选得到一种针对喹硫磷农药的纳米抗体，该纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码该纳米抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该纳米抗体能够识别喹硫磷农药，对其他有机磷类农药交叉反应率低；具有较高的热稳定性、有机耐受性。本发明提供的酶联免疫分析方法，最低检测限为2.57ng/mL，线性范围为5.84‑88.34ng/mL，检测结果准确、稳定性好，可以广泛的应用于农产品中喹硫磷农药残留的检测。

公开(公告)号：CN114702592A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210271306.5

申请日：2022-03-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  李家冬 ,  吴广培 ,  徐振林 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  G01N33/543 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种识别喹硫磷农药的纳米抗体及酶联免疫分析方法。本发明首先构建了一种噬菌体展示纳米抗体文库，并从噬菌体展示纳米抗体文库中筛选得到一种针对喹硫磷农药的纳米抗体，该纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码该纳米抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该纳米抗体能够识别喹硫磷农药，对其他有机磷类农药交叉反应率低；具有较高的热稳定性、有机耐受性。本发明提供的酶联免疫分析方法，最低检测限为2.57ng/mL，线性范围为5.84‑88.34ng/mL，检测结果准确、稳定性好，可以广泛的应用于农产品中喹硫磷农药残留的检测。