公开(公告)号：CN117965635A

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202410162338.0

申请日：2024-02-05

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院

Inventor： 林昊龙 ,  穆伟 ,  朱莉 ,  肖敏 ,  黄亮

IPC: C12N15/87 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/6881 ,  C12N15/11

Abstract: 本申请涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种制备对维奈托克耐药的急性T淋巴细胞白血病细胞系的方法；所述方法包括：混合Cas9蛋白和sgRNA‑HDR，并孵育，后加入ssDNA，得到混合物；对急性T淋巴细胞白血病细胞进行重悬，后加入混合物电转，得到编辑后细胞；对编辑后细胞孵育，第一培养，后流式分选，得到单克隆细胞；对单克隆细胞第二培养，后测序筛选，得到单细胞克隆；对单细胞克隆扩大培养并保种，得到急性T淋巴细胞白血病细胞；sgRNA‑HDR包括靶向BCL2基因的耐药突变点位；ssDNA包括BCL2基因的耐药突变点位的识别序列；该方法所得的细胞可以用于探究T‑ALL细胞对维耐托克的耐药机制和克服策略。

公开(公告)号：CN118562731A

公开(公告)日：2024-08-30

申请号：CN202410625503.1

申请日：2024-05-20

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院

Inventor： 林昊龙 ,  穆伟 ,  朱莉 ,  隗佳

IPC: C12N5/0783

Abstract: 本发明公开了一种体外高效扩增高质量临床级NK细胞的培养基以及培养方法，该培养基由基础培养基、血清/血清类似物以及IL‑2组成；基础培养基为KBM581培养基；血清/血清类似物选择FBS、Human AB Serum、HPL以及SR其中之一。使用该培养基两周内扩增倍数高于2000倍，高于其它文献报道的NK细胞扩增水平，最高组甚至达到5000倍以上，同时，扩增后的NK细胞纯度达90％以上，仍然具有良好的增殖活力和强大的肿瘤细胞杀伤能力。