公开(公告)号：CN101921733A

公开(公告)日：2010-12-22

申请号：CN201010028904.7

申请日：2010-01-05

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院

Inventor： 陈霄 ,  周子华 ,  廖玉华 ,  陈芬 ,  王敏 ,  刘祖霞 ,  邱志华 ,  张晓丽

IPC: C12N7/01 ,  A61K39/00 ,  A61P31/00 ,  A61P35/00

Abstract: 一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白，按如下方法制备：步骤1)将Qβ噬菌体CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为强终止密码子TAA后，克隆至原核表达载体pET28a(+)中，得到编码CP蛋白质粒pETQβ-CP；步骤2)在Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因中编码免疫优势决定区位置，即Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因第72位至73位密码子间，插入编码赖氨酸和亮氨酸的核苷酸AAGCTT，并将CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为GGA后克隆至原核表达载体PGEX4T-2中，得到编码A1蛋白质粒pGEXQβ-A1；步骤3)突变后编码Qβ噬菌体CP蛋白质粒与A1蛋白质粒共同转化大肠杆菌，诱导后表达得到病毒样颗粒蛋白Qβ-2aa。使用异双功能交联剂将短肽抗原耦联至Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒。

公开(公告)号：CN101921733B

公开(公告)日：2013-06-05

申请号：CN201010028904.7

申请日：2010-01-05

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院

Inventor： 陈霄 ,  周子华 ,  廖玉华 ,  陈芬 ,  王敏 ,  刘祖霞 ,  邱志华 ,  张晓丽

IPC: C12N7/01 ,  A61K39/00 ,  A61P31/00 ,  A61P35/00

Abstract: 一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白，按如下方法制备：步骤1)将Qβ噬菌体CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为强终止密码子TAA后，克隆至原核表达载体pET28a(+)中，得到编码CP蛋白质粒pETQβ-CP；步骤2)在Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因中编码免疫优势决定区位置，即Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因第72位至73位密码子间，插入编码赖氨酸和亮氨酸的核苷酸AAGCTT，并将CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为GGA后克隆至原核表达载体PGEX4T-2中，得到编码A1蛋白质粒pGEXQβ-A1；步骤3)突变后编码Qβ噬菌体CP蛋白质粒与A1蛋白质粒共同转化大肠杆菌，诱导后表达得到病毒样颗粒蛋白Qβ-2aa。使用异双功能交联剂将短肽抗原耦联至Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒。