公开(公告)号：CN114958901B

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202210571333.4

申请日：2022-05-24

Applicant: 华中科技大学

Inventor： 张敏 ,  于洪军 ,  胡鑫霖 ,  杨坪 ,  吴亚楠 ,  杨依争 ,  丁旭扬

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12Q1/48 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一种抗真菌药物作用靶点的体外制备、活性检测及其应用，属于药物靶点材料及其制备和应用领域。本发明中的药物靶点为抑制真菌细胞壁合成的关键酶FKS(β‑1,3‑葡聚糖合成酶)。通过真核生物表达系统体外制备了具有活性的药物作用靶点蛋白，利用其能够将底物转变成UDP(尿苷二磷酸)的特点建立了有效的酶活分析体系，可以应用于检测具有抑制酶活的药物或化合物，该体系具有进行药物筛选的可行性；另外还开展了FKS酶活检测方法在鉴定真菌耐药突变株方面的应用。

公开(公告)号：CN116200410A

公开(公告)日：2023-06-02

申请号：CN202310061708.7

申请日：2023-01-18

Applicant: 华中科技大学

Inventor： 张敏 ,  于洪军 ,  杨坪 ,  柴长栋 ,  胡鑫霖

IPC: C12N15/54 ,  C12N1/19 ,  C12N9/10 ,  C12N15/81 ,  C12P19/18 ,  C12P19/08 ,  C12Q1/48 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及一种酶活提高的葡聚糖合成酶突变体及制备与药物筛选应用，属于生物工程、微生物发酵技术及药物筛选技术领域。本发明提供了一种酶活性提高的重组β‑1,3‑葡聚糖合成酶突变体与其构建方法、产物测定方法和药物筛选应用。本发明突变了天然β‑1,3‑葡聚糖合成酶(FKS1)的基因序列，并在此基础上获得了酵母的重组β‑1,3‑葡聚糖合成酶突变体FKS1‑S643P，其在加入卡泊芬净后合成葡聚糖的能力得到了显著的提高。另外，FKS1‑S643P突变体相比天然FKS1而言，对棘白菌素类抗真菌药物卡泊芬净耐受而对新型改良棘白菌素类抗真菌药物米卡芬净高度敏感，因此该突变体还可应用于研发新型抗真菌药物。

公开(公告)号：CN114958901A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210571333.4

申请日：2022-05-24

Applicant: 华中科技大学

Inventor： 张敏 ,  于洪军 ,  胡鑫霖 ,  杨坪 ,  吴亚楠 ,  杨依争 ,  丁旭扬

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12Q1/48 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一种抗真菌药物作用靶点的体外制备、活性检测及其应用，属于药物靶点材料及其制备和应用领域。本发明中的药物靶点为抑制真菌细胞壁合成的关键酶FKS(β‑1,3‑葡聚糖合成酶)。通过真核生物表达系统体外制备了具有活性的药物作用靶点蛋白，利用其能够将底物转变成UDP(尿苷二磷酸)的特点建立了有效的酶活分析体系，可以应用于检测具有抑制酶活的药物或化合物，该体系具有进行药物筛选的可行性；另外还开展了FKS酶活检测方法在鉴定真菌耐药突变株方面的应用。