公开(公告)号：CN115044554B

公开(公告)日：2023-12-08

申请号：CN202210508570.6

申请日：2022-05-11

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 胡瑞雪 ,  顾泽茂 ,  艾单寒 ,  侯家昊 ,  陈丹

IPC: C12N5/0786

Abstract: 本发明公开了一种黑斑蛙脾脏巨噬细胞的分离纯化及原代培养方法，包含以下步骤：(1)脾脏的获取；(2)将脾脏组织用PBS缓冲液清洗，然后放入AIM液中浸泡；(3)将浸泡后的组织块转移至细胞筛，研磨组织块并用漂洗液冲洗；(4)收集研磨过筛后的细胞悬液，加入到预先配制好的Percoll分离液，离心；(5)无菌吸管取出目的细胞层，用漂洗液漂洗；(6)将漂洗后的细胞用完全培养基重悬，于28‑37℃条件下培养12‑24h，使用差速贴壁法对获得的细胞进行纯化。本发明首次建立蛙脾脏巨噬细胞的分离和培养方法，该方法操作简单方便，培养效率和成功率高，为进一步研究黑斑蛙巨噬细胞的功能奠定了基础。

公开(公告)号：CN115044554A

公开(公告)日：2022-09-13

申请号：CN202210508570.6

申请日：2022-05-11

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 胡瑞雪 ,  顾泽茂 ,  艾单寒 ,  侯家昊 ,  陈丹

IPC: C12N5/0786

Abstract: 本发明公开了一种黑斑蛙脾脏巨噬细胞的分离纯化及原代培养方法，包含以下步骤：(1)脾脏的获取；(2)将脾脏组织用PBS缓冲液清洗，然后放入AIM液中浸泡；(3)将浸泡后的组织块转移至细胞筛，研磨组织块并用漂洗液冲洗；(4)收集研磨过筛后的细胞悬液，加入到预先配制好的Percoll分离液，离心；(5)无菌吸管取出目的细胞层，用漂洗液漂洗；(6)将漂洗后的细胞用完全培养基重悬，于28‑37℃条件下培养12‑24h，使用差速贴壁法对获得的细胞进行纯化。本发明首次建立蛙脾脏巨噬细胞的分离和培养方法，该方法操作简单方便，培养效率和成功率高，为进一步研究黑斑蛙巨噬细胞的功能奠定了基础。