公开(公告)号：CN110878302B

公开(公告)日：2022-12-13

申请号：CN201911198641.1

申请日：2019-11-27

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 姚璇 ,  郭亮 ,  胡红红 ,  杨特武 ,  郑祥波 ,  戴泽彰

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/113 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR‑Cas9系统敲除甘蓝型油菜Bna.TT8基因的方法及应用，设计了特异性靶向甘蓝型油菜Bna.TT8基因的sgRNA并制成Oligo二聚体，与Cas9载体连接，通过农杆菌介导的遗传转化技术导入到甘蓝型油菜下胚轴愈伤并再生成苗，Cas9核酸酶在sgRNA的引导下，剪切目标序列，每条sgRNA都能通过CRISPRcas9系统介导A和C基因组上Bna.TT8基因的剪切，达到基因敲除的目的。经过表型鉴定，发现纯合突变株系的抗旱性显著增强，同时含油量也明显提高，为油菜性状改良提供了新方法。

公开(公告)号：CN110878302A

公开(公告)日：2020-03-13

申请号：CN201911198641.1

申请日：2019-11-27

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 姚璇 ,  郭亮 ,  胡红红 ,  杨特武 ,  郑祥波 ,  戴泽彰

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR-Cas9系统敲除甘蓝型油菜Bna.TT8基因的方法及应用，设计了特异性靶向甘蓝型油菜Bna.TT8基因的sgRNA并制成Oligo二聚体，与Cas9载体连接，通过农杆菌介导的遗传转化技术导入到甘蓝型油菜下胚轴愈伤并再生成苗，Cas9核酸酶在sgRNA的引导下，剪切目标序列，每条sgRNA都能通过CRISPRcas9系统介导A和C基因组上Bna.TT8基因的剪切，达到基因敲除的目的。经过表型鉴定，发现纯合突变株系的抗旱性显著增强，同时含油量也明显提高，为油菜性状改良提供了新方法。