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公开(公告)号：CN119979483A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510143667.5
申请日：2025-02-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/01 , A61K39/12 , A61P31/12 , C12N15/861 , C12N15/62
Abstract: 本发明公开了一种自发产生病毒样颗粒的重组腺病毒制备方法及应用，涉及生物技术领域。该重组腺病毒制备方法包括以下步骤：将病毒膜蛋白基因与促出芽EARP基因连接，构建得到重组外源病毒膜蛋白基因；将所述重组外源病毒膜蛋白基因插入腺病毒骨架质粒的E3区域，得到重组骨架质粒；将所述重组外源病毒膜蛋白基因插入腺病毒穿梭质粒的E1区域，得到重组穿梭质粒；将所述重组骨架质粒和所述重组穿梭质粒共转染至宿主细胞，得到自发产生病毒样颗粒(VLP)的重组腺病毒。利用该制备方法构建的重组腺病毒可在体内外感染过程中自发组装包含病毒外膜蛋白的VLP，进而可以极大地提高疫苗的免疫原性，简化VLP生产工艺，降低疫苗的生产成本。
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公开(公告)号：CN119286794A
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202411626272.2
申请日：2024-11-14
Applicant: 华中农业大学 , 武汉科前生物股份有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一株产生犬细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株3D7及其应用，属于生物检测技术领域。所述杂交瘤细胞株3D7的保藏编号为CCTCC NO：C2024216。以本发明提供的杂交瘤细胞株3D7产生的单克隆抗体为捕获抗体制备犬细小病毒病胶体金检测试纸条，能够准确检测犬细小病毒，特异性好，敏感性高，并且能够识别CPV‑2、CPV‑2a、CPV‑2b和CPV‑2c多种亚型的CPV毒株，广谱性好，在最低检出量方面优于市售商业化胶体金试纸条。该试纸条与PCR符合率较高。本发明为CPV的快速现场诊断提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN117025675B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311001989.3
申请日：2023-08-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N7/01 , C12N5/10 , A61K39/205 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种提高Admax重组腺病毒包装系统的外源基因表达量的方法及应用，涉及基因工程技术领域。该方法包括以下步骤：构建第一外源基因的基因表达盒，利用Gibson基因重组方法将所述基因表达盒导入线性化骨架质粒的E3区域，得到重组骨架质粒；将第二外源基因连接入穿梭质粒的E1区域，得到重组穿梭质粒；将所述重组骨架质粒与重组穿梭质粒共转染至HEK 293细胞，得到重组腺病毒。本发明旨在解决Admax系统外源基因装载量少，骨架质粒改造困难，未充分利用E3区域的现存问题。实例证明，本发明显著提高Admax重组腺病毒包装系统的外源基因表达量，实现同时表达多种外源基因，显著提高其作为疫苗载体的免疫原性。
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公开(公告)号：CN110577593A
公开(公告)日：2019-12-17
申请号：CN201910586801.3
申请日：2019-07-01
Applicant: 华中农业大学 , 广州天宝颂原生物科技开发有限公司
Abstract: 本发明公开了一种小分子的近红外光荧光蛋白，所述近红外荧光蛋白包括BDFP近红外光荧光蛋白的氨基酸序列，并且包括在第24位，27位，30位，31位，38位的氨基酸处的突变，所述BDFP远红光荧光蛋白的氨基酸序列如SED ID NO:1～14任一所示。本发明提供的近红外荧光蛋白有效亮度高，分子量小并且是单体结构的近红外荧光蛋白，相比现有近红外荧光蛋白更适合作为蛋白融合标签序列。
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公开(公告)号：CN110305199A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910464535.7
申请日：2019-05-30
Applicant: 华中农业大学 , 广州天宝颂原生物科技开发有限公司
IPC: C07K14/195 , C07K19/00 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了结合藻红胆素的荧光生物标记物及标记方法，公开了BDFP3.3的制备方法，采用PEB替代PΦB进行外源添加，得到全新的荧光蛋白。而且在BDFP3.3的基础上，得到新的荧光蛋白BDFP1.2:3.3:1.2以及BDFP1.6:3.3:1.6。有效亮度提高了，而且可适用于生物荧光标记，维持了远红光区域的荧光光谱特征和单体低聚状态。本发明增加藻红色素的选择，提高了蛋白的显色度，提高了融合蛋白的质量。
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公开(公告)号：CN110218704A
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201910426153.5
申请日：2019-05-21
Applicant: 华中农业大学 , 武汉康湃特生物科技有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种抗狂犬病毒G蛋白的单克隆抗体，它是由杂交瘤细胞株RABV G Mab 7A3分泌的，所述杂交瘤细胞株RABV G Mab 7A3保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C201975。本发明还公开了该单克隆抗体在制备狂犬病毒检测试剂盒中的应用以及一种狂犬病毒中和抗体竞争ELISA检测试剂盒，该试剂盒以狂犬病毒LBNSE毒株的全病毒蛋白为包被原，以量子点标记的单克隆抗体为竞争抗体，具有病毒传播风险小、检测灵敏度和准确性高，特异性好等优点。
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公开(公告)号：CN109593120A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201910034039.8
申请日：2019-01-15
Applicant: 华中农业大学 , 广州天宝颂原生物科技开发有限公司
Abstract: 本发明公开了一种脱辅基蛋白，由野生型脱辅基蛋白N端序列修饰得到。本发明中还公开了一种可用于表达合成类胡萝卜素蛋白的微生物，该微生物含有两种质粒，质粒A携带基因a，基因a用于合成β-胡萝卜素，质粒B携带有基因b和基因c，基因b用于将β-胡萝卜素转化成类胡萝卜素，基因c用于合成脱辅基蛋白。使用该微生物可以以单一诱导的方法表达出类胡萝卜素蛋白，流程简捷，耗时短，生产周期仅18h左右；色素蛋白产量大，相比于现有技术，色素蛋白产量提高10倍；纯度高，纯度比值2.4，可用于单晶体制备。
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公开(公告)号：CN105695421B
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201610145142.6
申请日：2016-03-14
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种长效的重组狂犬病病毒疫苗株，它是以SAD‑B19为母本毒株，将所述母本毒株G蛋白上194位的天冬氨酸突变为丝氨酸、333位的精氨酸突变为谷氨酸，并且在所述母本毒株的基因组G基因和L基因之间被插入鼠IL‑7基因。本发明还公开了该病毒疫苗株的制备方法。本发明公开的重组病毒具有良好的复制性，安全性，通过插入鼠IL‑7基因增强了免疫原性，能维持机体的长久体液免疫反应，并且再次共同免疫时，重组狂犬病毒的中和抗体水平能够迅速升高，是一种优良的狂犬病疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN103525776A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201310502446.X
申请日：2013-10-23
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组狂犬病病毒口服疫苗株，它是以SAD-B19为母本毒株，所述母本毒株G蛋白上194位的天冬氨酸突变为丝氨酸、333位的精氨酸突变为谷氨酸，并且所述母本毒株的基因组G基因和L基因之间被插入犬GM-CSF基因。本发明还公开了该重组狂犬病病毒口服疫苗株的制备方法。本发明的重组狂犬病病毒口服疫苗株具有良好的复制性，安全性，并且通过犬GM-CSF基因的插入增强了免疫原性，口服免疫后可以诱导高水平的中和抗体，显著优于LBNSE病毒（欧洲用于野生动物免疫的疫苗株），可以作为狂犬病口服疫苗的候选株。
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公开(公告)号：CN119242594A
公开(公告)日：2025-01-03
申请号：CN202411625533.9
申请日：2024-11-14
Applicant: 华中农业大学 , 武汉科前生物股份有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了犬冠状病毒N蛋白的单抗、免疫胶体金试纸条及其制备方法，属于生物检测技术领域。本发明提供了一株杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株命名为4A8，所述4A8的保藏编号为CCTCC NO：C2024304，以及由所述杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体4A8。还公开了所述的杂交瘤细胞株或所述的单克隆抗体4A8在制备犬冠状病毒的检测试剂或检测试剂盒中的应用。此外，本发明还公开了一种用于检测犬冠状病毒N蛋白的免疫胶体金试纸条及其制备方法，检测的47份临床样本中，胶体金试纸条的总符合率为89.36％。本发明建立的CCoV胶体金试纸条检测方法方便、灵敏性好，对诊断、预防和控制犬冠状病毒病具有重要意义。
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