公开(公告)号：CN113122546A

公开(公告)日：2021-07-16

申请号：CN202110440720.X

申请日：2021-04-23

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 黄求应 ,  周玮 ,  赵星颖 ,  高勇勇 ,  刘龙

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N15/89 ,  A01N63/30 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种黑胸散白蚁SeBP基因及其dsRNA结合金龟子绿僵菌在白蚁防治中的应用，该白蚁SeBP基因核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，并基于该白蚁SeBP基因设计得到白蚁SeBP基因dsRNA；将dsRNA注射入白蚁体内；注射dsRNA的无菌白蚁主动接触直接感染绿僵菌的未注射白蚁，获得少量绿僵菌孢子成为受菌同伴白蚁；在规定观测时间后受菌同伴白蚁的抗菌活性和存活率显著下降，表明受菌同伴白蚁的主动免疫被打破，注射dsSeBP显著提高了绿僵菌对白蚁的防治效果。本发明获得的SeBP基因可作为白蚁防治的分子靶标，与金龟子绿僵菌结合使用，有效提高白蚁防治效果，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN111748533A

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN202010632198.0

申请日：2020-07-03

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 黄求应 ,  赵星颖 ,  刘龙

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/10 ,  A01N63/30 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种黑胸散白蚁SelT基因dsRNA结合金龟子绿僵菌在白蚁防治中的应用。所述的黑胸散白蚁SelT基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1；基于SEQ ID NO:1，设计引物扩增PCR获得SelT基因片段SEQ ID NO:6，根据扩增片段SEQ ID NO:6设计含T7启动子的引物合成相应的dsRNA。将合成的特异性dsRNA注射入白蚁体内；注射dsRNA的无菌白蚁主动接触直接感染绿僵菌的未注射白蚁，获得少量绿僵菌孢子成为受菌同伴白蚁；受菌同伴白蚁的抗菌活性和存活率显著下降，表明受菌同伴白蚁的主动免疫被打破，注射dsSelT显著提高了绿僵菌对白蚁的防治效果。本发明获得的SelT基因可作为白蚁防治的分子靶标，与金龟子绿僵菌结合使用，有效提高白蚁防治效果，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN111849984B

公开(公告)日：2021-07-16

申请号：CN202010706865.5

申请日：2020-07-21

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 黄求应 ,  刘龙 ,  徐焕 ,  雷朝亮 ,  赵星颖

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  A01N57/16 ,  A01N63/30 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明涉及一种能提高金龟子绿僵菌防治白蚁效果的IDH基因dsRNA。本发明中dsRNA的序列设计来源于黑胸散白蚁和黑翅土白蚁体内一种关键代谢酶基因，即异柠檬酸脱氢酶（Isocitrate dehydrogenase,IDH）基因。利用IDH基因的特异性引物合成IDH dsRNA模板，随后通过T7体外转录系统转录生成dsIDH。采用RNAi技术将dsIDH导入白蚁体内后，IDH基因表达降低，白蚁抗真菌活性显著下降，细胞凋亡率增加，感染水平升高，IDH活性下降，ATP水平下降，运动距离降低，白蚁死亡率显著增加。本发明提供的dsIDH能显著提高金龟子绿僵菌对白蚁的防治效果，对环境友好，对人畜安全，具有良好的研究和应用前景。

公开(公告)号：CN111748533B

公开(公告)日：2021-04-02

申请号：CN202010632198.0

申请日：2020-07-03

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 黄求应 ,  赵星颖 ,  刘龙

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/10 ,  A01N63/30 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种黑胸散白蚁SelT基因dsRNA结合金龟子绿僵菌在白蚁防治中的应用。所述的黑胸散白蚁SelT基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1；基于SEQ ID NO:1，设计引物扩增PCR获得SelT基因片段SEQ ID NO:6，根据扩增片段SEQ ID NO:6设计含T7启动子的引物合成相应的dsRNA。将合成的特异性dsRNA注射入白蚁体内；注射dsRNA的无菌白蚁主动接触直接感染绿僵菌的未注射白蚁，获得少量绿僵菌孢子成为受菌同伴白蚁；受菌同伴白蚁的抗菌活性和存活率显著下降，表明受菌同伴白蚁的主动免疫被打破，注射dsSelT显著提高了绿僵菌对白蚁的防治效果。本发明获得的SelT基因可作为白蚁防治的分子靶标，与金龟子绿僵菌结合使用，有效提高白蚁防治效果，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN111849984A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010706865.5

申请日：2020-07-21

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 黄求应 ,  刘龙 ,  徐焕 ,  雷朝亮 ,  赵星颖

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  A01N57/16 ,  A01N63/30 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明涉及一种能提高金龟子绿僵菌防治白蚁效果的IDH基因dsRNA。本发明中dsRNA的序列设计来源于黑胸散白蚁和黑翅土白蚁体内一种关键代谢酶基因，即异柠檬酸脱氢酶（Isocitrate dehydrogenase,IDH）基因。利用IDH基因的特异性引物合成IDH dsRNA模板，随后通过T7体外转录系统转录生成dsIDH。采用RNAi技术将dsIDH导入白蚁体内后，IDH基因表达降低，白蚁抗真菌活性显著下降，细胞凋亡率增加，感染水平升高，IDH活性下降，ATP水平下降，运动距离降低，白蚁死亡率显著增加。本发明提供的dsIDH能显著提高金龟子绿僵菌对白蚁的防治效果，对环境友好，对人畜安全，具有良好的研究和应用前景。