单唾液酸四己糖神经节苷脂的制备方法

    公开(公告)号:CN1570080A

    公开(公告)日:2005-01-26

    申请号:CN200410018280.5

    申请日:2004-05-12

    Abstract: 本发明公开了一种单唾液酸四己糖神经节苷脂的制备方法。本发明制备唾液酸四己糖神经节苷脂的发酵菌种为厄菌属(Oerskovia sp.),溶黄嘌呤厄菌(Oerskovia xanthineolytica),是从土壤中自然筛选得到的野生菌株,对无GM1神经节苷脂底物的转化率可以达到60%。诱变菌株交中国典型培养物保藏中心保藏,其保藏号为CCTCC M204032。本发明通过微生物转化方法,将神经节苷脂提取物中的其它组份发酵转化成GM1,较现有方法提取率提高100%。该方法操作简便、成本低廉,为GM1大规模生产提供了可能。

    一种用于枯草芽孢杆菌产抑菌物质的培养基及其优化方法

    公开(公告)号:CN113755369A

    公开(公告)日:2021-12-07

    申请号:CN202110946865.7

    申请日:2021-08-18

    Abstract: 本发明提供一种用于枯草芽孢杆菌产抑菌物质的培养基及其优化方法。该优化方法包括以下步骤:1)抑菌实验指示菌培养;2)通过对碳源种类、碳氮比、金属离子的浓度进行调整,配制不同发酵培养基;3)向所述发酵培养基中接入枯草芽孢杆菌,培养菌体获得发酵液;4)将发酵液离心后,收集上清液,制备无细胞的发酵液上清;5)通过测定所述发酵液上清的抑菌效果,分别筛选出最佳的碳源种类、碳氮比、金属离子的浓度,从而获得一种优化的用于枯草芽孢杆菌产抑菌物质的培养基。本发明通过改善培养基组成使发酵液的抑菌效果得到大幅提高,最终获得一种最优化的枯草芽孢杆菌产抑菌脂肽的培养基,因此本发明对于益生菌的工业发展具有重要的参考价值。

    一种生物转化植物甾醇制备甾体药物中间体的方法

    公开(公告)号:CN103740799B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410027059.X

    申请日:2014-01-21

    Abstract: 本发明提供一种生物转化植物甾醇制备甾体药物中间体的方法,包括以下步骤:1)提供植物甾醇的悬浊液;2)提供一种将植物甾醇转化为甾体药物中间体的微生物菌种的静息细胞;3)将所述植物甾醇的悬浊液以及所述静息细胞混合,并加入β-环糊精或化学修饰后的β-环糊精充分混匀,培养完成转化;4)将步骤3)所得转化液离心,分离上清和菌体,经溶剂提取从上清中分离得到所述甾体药物中间体。本发明提供的方法在提高了甾醇投料浓度、增加目的产物量、缩短转化持续时间的同时,还同时实现了菌体、助溶剂以及产物的简易分离,并实现了菌体与助溶剂的多次重复使用,大大节省了生产成本,适合工业化生产。

    高纯度白细胞介素-24包涵体的制备方法

    公开(公告)号:CN103864914A

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201410119737.5

    申请日:2014-03-27

    CPC classification number: C07K14/54 C12N15/70

    Abstract: 本发明涉及一种高纯度白细胞介素-24包涵体的制备方法,包括以下步骤:制备含有白细胞介素-24基因的重组大肠杆菌;重组大肠杆菌进行发酵培养;发酵培养后得到的菌体进行超声破碎得到包涵体;对包涵体进行洗涤;对洗涤后的包涵体进行变性与复性,得到白细胞介素-24蛋白。与现有技术相比,本发明通过对大肠杆菌生产白细胞介素-24培养条件进行优化,获得较疏松的白细胞介素-24包涵体结构,提高了蛋白在高浓度下的复性的效率,同时,本发明方法使白细胞介素-24的变性效率和复性效率分别提高了50.52%和83.78%,操作简单,节约了生产成本。这种通过优化培养条件来简化其纯化过程的方法可适用于其它有类似包涵体结构特点的蛋白。

    一种毕赤酵母基因工程菌发酵生产S-腺苷甲硫氨酸的方法

    公开(公告)号:CN101570771A

    公开(公告)日:2009-11-04

    申请号:CN200910052700.4

    申请日:2009-06-09

    Abstract: 本发明公开了一种由毕赤酵母基因工程菌发酵生产S-腺苷甲硫氨酸的方法,包括将整合了外源表达基因S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的毕赤酵母基因工程菌种子液接种到发酵培养基中进行发酵培养,其特征在于:所述的毕赤酵母基因工程菌种子液接种到发酵培养基中的接种量是5~10(v/v)%;所述的发酵培养中的培养条件是28~32℃,pH3.0~8.0,溶氧水平保持30%~100%;培养至菌体密度为80~120g/L时,向发酵培养基中添加甲醇开始甲醇诱导,甲醇浓度控制在0.3~1.0(w/v)%,同时添加L-甲硫氨酸浓度控制在12.5~100mmol/L和添加硫酸铵控制铵离子浓度在300~600mmol/L。本发明的发酵生产S-腺苷甲硫氨酸的方法在100h发酵时间内积累SAM产量可达到11.6g/L以上,因此,发酵周期短、SAM产量高且操作简便,可用于SAM的大规模生产制备。

    一种生物转化植物甾醇制备甾体药物中间体的方法

    公开(公告)号:CN103740799A

    公开(公告)日:2014-04-23

    申请号:CN201410027059.X

    申请日:2014-01-21

    Abstract: 本发明提供一种生物转化植物甾醇制备甾体药物中间体的方法,包括以下步骤:1)提供植物甾醇的悬浊液;2)提供一种将植物甾醇转化为甾体药物中间体的微生物菌种的静息细胞;3)将所述植物甾醇的悬浊液以及所述静息细胞混合,并加入β-环糊精或化学修饰后的β-环糊精充分混匀,培养完成转化;4)将步骤3)所得转化液离心,分离上清和菌体,经溶剂提取从上清中分离得到所述甾体药物中间体。本发明提供的方法在提高了甾醇投料浓度、增加目的产物量、缩短转化持续时间的同时,还同时实现了菌体、助溶剂以及产物的简易分离,并实现了菌体与助溶剂的多次重复使用,大大节省了生产成本,适合工业化生产。

    利用大肠杆菌累积生产肿瘤转移抑制蛋白GDI2的方法

    公开(公告)号:CN102286580B

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201110185013.7

    申请日:2011-07-04

    Abstract: 本发明涉及利用大肠杆菌累积生产肿瘤转移抑制蛋白GDI2的方法,将已完成构建大肠杆菌经一级、二级种子培养后,按接种量3wt%将二级种子培养液接种到发酵罐中,控制发酵温度为37℃、pH为7.0,待发酵液中溶氧出现明显上升时开始流加补料培养基,使菌体在恒定的比生长速率条件下进行生长,最终实现高细胞密度发酵,最终菌浓OD可达到116,经0.2mM IPTG诱导4h后,获得肿瘤转移抑制蛋白GDI2。与现有技术相比,本发明可有效的减少发酵过程中的非最有经济阶段,且发酵策略控制简单、目的蛋白产量较高,具有较大的工业化应用前景。

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