公开(公告)号：CN120060197A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510239067.9

申请日：2025-02-28

Applicant: 华东理工大学

Inventor： 杨弋 ,  张玉玲

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  G01N33/573 ,  C12P19/34 ,  C12Q1/686 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种新型耐高温和耐抑制剂的M‑MLV RT突变体及其多核苷酸分子、制备方法、酶活检测方法与RNA逆转录方法、含有M‑MLV RT突变体的载体、重组工程细胞株与试剂盒。具体地，本发明建立一种基于RNA适配体检测M‑MLV RT酶活方法，并且通过定点突变和组合突变，最终筛选出耐高温的M‑MLV RT突变体(Max5.0)，其氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。相比天然M‑MLV RT和商品化SuperScriptⅢ逆转录酶，M‑MLV RT突变体在65℃下依旧可以进行高效的逆转录反应，同时对KCl和甲酰胺具有良好的耐受性并且反应灵敏度高。