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    对正丁醇特异性响应的BmoR蛋白突变体及其应用
    2.
    发明授权
    对正丁醇特异性响应的BmoR蛋白突变体及其应用 有权

    公开(公告)号：CN115160415B

    公开(公告)日：2024-02-09

    申请号：CN202110361566.7

    申请日：2021-04-02

    Applicant: 北京理工大学

    Inventor： 霍毅欣 ,  陈振娅 ,  毋彤

    IPC: C07K14/21 ,  C12N15/31 ,  G01N21/64 ,  C12N15/70 ,  C12N15/65 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种对正丁醇特异性响应的BmoR蛋白突变体，及其在正丁醇检测或生物传感器中的应用。所述BmoR蛋白突变体是在序列表SEQ ID NO.1所示的野生型BmoR蛋白的基础上发生包含I183T和/或D273N的突变获得的。I183T、D273N和I183T/D273N突变体仅对正丁醇敏感，对异丁醇无响应，解决了野生型BmoR蛋白无法区分正丁醇和异丁醇高产菌株的问题；同时I183T/D273N对正丁醇的检测范围达到0‑100mM，提高了BmoR蛋白对正丁醇的响应饱和度，可用于更高产量菌株的筛选和应用。

    一种基于BmoR突变体的高敏感性的生物传感器
    4.
    发明公开
    一种基于BmoR突变体的高敏感性的生物传感器 审中-实审

    公开(公告)号：CN115991748A

    公开(公告)日：2023-04-21

    申请号：CN202111230106.7

    申请日：2021-10-20

    Applicant: 北京理工大学

    Inventor： 霍毅欣 ,  陈振娅 ,  毋彤

    IPC: C07K14/21 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/68 ,  G01N33/53 ,  C12R1/19

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种能够灵敏检测高级醇的BmoR蛋白突变体，及其在高级醇检测或生物传感器中的应用。所述BmoR蛋白突变体是在序列表SEQ ID NO.1所示的野生型BmoR蛋白的基础上发生V311A突变获得的，具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列V311A突变体能够更灵敏的对正丁醇(2.13×10‑6mM)和异丁醇(1.94×10‑6mM)进行检测，解决了野生型BmoR蛋白灵敏度低，无法筛选极低浓度的高级醇问题，可用于低产高级醇菌株的筛选和应用。

    一种高效简便纯化蛋白的方法
    5.
    发明授权
    一种高效简便纯化蛋白的方法 有权

    公开(公告)号：CN110714020B

    公开(公告)日：2021-08-03

    申请号：CN201910426745.7

    申请日：2019-05-22

    Applicant: 北京理工大学

    Inventor： 陈振娅 ,  霍毅欣 ,  赵璐瑶

    IPC: C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C07K14/435 ,  C12R1/19

    Abstract: 传统的柱层析纯化重组蛋白的工艺生产成本较高，步骤繁琐。基于亲和标签的非色谱纯化方法可降低成本，提高靶蛋白产量，但标签去除成本较高。为解决上述问题，本发明提出了一种仅需离心和裂解步骤的简便、高效的纯化方法。该方法使用了CipA包涵体蛋白和内含肽蛋白(Synechocystis sp.PCC6803 DnaB，Ssp DnaB)，利用CipA的自组装功能和DnaB的在弱酸条件下的自裂解功能来实现蛋白纯化。其中靶蛋白可以是要表达和纯化的任意一种蛋白，且纯化后纯度可达95％以上。此外，本发明还对CipA和DnaB之间的连接肽进行了优化，进一步提高了DnaB的裂解效率，同时降低了CipA对靶蛋白活性的影响。该方法有潜力应用于酶的工业化生产。关键词：蛋白质纯化方法，包涵体蛋白CipA，自断裂蛋白DnaB。

    对异戊醇特异性响应的BmoR突变体及其应用
    7.
    发明公开
    对异戊醇特异性响应的BmoR突变体及其应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN119462864A

    公开(公告)日：2025-02-18

    申请号：CN202411579131.X

    申请日：2024-11-07

    Applicant: 北京理工大学

    Inventor： 霍毅欣 ,  陈振娅 ,  张然 ,  毋彤

    IPC: C07K14/21 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12N15/75 ,  C12N15/81 ,  C12N15/65 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  G01N21/64 ,  C12R1/125 ,  C12R1/19 ,  C12R1/865

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种对异戊醇/正丁醇特异性响应的BmoR蛋白突变体，及其在异戊醇/正丁醇检测或生物传感器中的应用。所述BmoR蛋白突变体是在序列表SEQ ID NO.1所示的野生型BmoR蛋白的基础上发生包含W128R的突变获得的，具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列W128R突变体对异戊醇/正丁醇有特异性响应，W128R突变体仅对异戊醇/正丁醇敏感，对正戊醇/异丁醇无响应，解决了野生型BmoR蛋白无法区分同分异构体和结构类似物的问题；同时W128R对异戊醇检测范围达到0‑60mM和对正丁醇的检测范围达到0‑100mM，提高了BmoR蛋白对异戊醇/正丁醇的响应饱和度，可用于更高产量菌株的筛选和应用。

    一株耐盐济州杆菌及其应用
    9.
    发明公开
    一株耐盐济州杆菌及其应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN119020189A

    公开(公告)日：2024-11-26

    申请号：CN202310611983.1

    申请日：2023-05-26

    Applicant: 北京理工大学

    Inventor： 霍毅欣 ,  定婷婷 ,  陈振娅

    IPC: C12N1/20 ,  B09C1/10 ,  C02F3/34 ,  C12R1/01 ,  C02F101/34

    Abstract: 本发明涉及一株耐盐微生物济州杆菌及其应用，属于微生物技术领域。所述济州杆菌(Jejubacter sp.)DT01，保藏编号为CGMCC No.26777。济州杆菌(Jejubacter sp.)DT01能够同时在较高盐浓度(0‑150g/L)和较高酚酸类化合物浓度(0‑1000mg/L)的条件下正常生长，并且具有底物多样性，除了普通碳源比如葡萄糖、果糖等可直接利用的碳源外，其不仅能够分解间羟基苯丙酸、苯丙酸、肉桂酸、阿魏酸、苯甲酸和对羟基苯甲酸等酚酸类化合物，还能够利用上述酚酸类化合物作为唯一碳源进行生长。

    一种高效简便纯化蛋白的方法
    10.
    发明公开
    一种高效简便纯化蛋白的方法 有权

    公开(公告)号：CN110714020A

    公开(公告)日：2020-01-21

    申请号：CN201910426745.7

    申请日：2019-05-22

    Applicant: 北京理工大学

    Inventor： 陈振娅 ,  霍毅欣 ,  赵璐瑶

    IPC: C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C07K14/435 ,  C12R1/19

    Abstract: 传统的柱层析纯化重组蛋白的工艺生产成本较高，步骤繁琐。基于亲和标签的非色谱纯化方法可降低成本，提高靶蛋白产量，但标签去除成本较高。为解决上述问题，本发明提出了一种仅需离心和裂解步骤的简便、高效的纯化方法。该方法使用了CipA包涵体蛋白和内含肽蛋白(Synechocystis sp.PCC6803 DnaB，Ssp DnaB)，利用CipA的自组装功能和DnaB的在弱酸条件下的自裂解功能来实现蛋白纯化。其中靶蛋白可以是要表达和纯化的任意一种蛋白，且纯化后纯度可达95％以上。此外，本发明还对CipA和DnaB之间的连接肽进行了优化，进一步提高了DnaB的裂解效率，同时降低了CipA对靶蛋白活性的影响。该方法有潜力应用于酶的工业化生产。关键词：蛋白质纯化方法，包涵体蛋白CipA，自断裂蛋白DnaB。

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