公开(公告)号：CN105838734B

公开(公告)日：2019-06-18

申请号：CN201610377504.4

申请日：2016-05-31

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李颖岳 ,  王欢 ,  庞晓明 ,  黄飞逸 ,  崔艳红 ,  侯璐

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及一种利用叶片为受体建立酸枣遗传转化体系的方法，属于植物细胞工程和分子生物学技术领域。将酸枣叶片接种于WPM不定芽启动培养基中暗培养诱导2～4d，得到外植体；将含有植物表达载体的农杆菌菌液侵染外植体，得到被侵染的外植体；将被侵染的外植体置于WPM固体培养基上，暗培养2～4d；将暗培养后的叶片转入WPM固体筛选培养基中进行暗培养，共暗培养14～16d后移至光下，在含0.1mg/L吲哚乙酸和0.5mg/L赤霉素的WPM培养基中进行叶片再生的伸长培养，得到不定芽，将不定芽转到MS培养基中进行扩繁，得到遗传转化后的酸枣植株。本发明提供的酸枣遗传转化体系方法为酸枣提供了合适的再生体系，且转化频率高，重复性高，有利于酸枣的遗传改良。

公开(公告)号：CN108333013A

公开(公告)日：2018-07-27

申请号：CN201810137942.2

申请日：2018-02-10

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李颖月 ,  黄飞逸 ,  崔艳红 ,  庞晓明 ,  李翔

IPC: G01N1/30

CPC classification number: G01N1/30

Abstract: 本发明提供了一种枣花石蜡切片的制备方法，属于石蜡切片技术领域。所述制备方法包括如下步骤：1)将枣花花蕾固定；所述枣花花蕾带有一段长度为0.3～0.5cm的茎段；2)脱水；3)第一透明处理；4)第二透明处理；5)浸蜡；6)包埋；7)修蜡；8)切片；9)展片；10)脱蜡；11)复水；12)二次复水；13)染色；14)盖片、封片。本发明提供的枣花石蜡切片制备方法，能够得到胚囊完整的纵截面，进而方便观察胚囊内部细胞和组织结构的发育变化以及枣花细胞形态，同时通过观察枣花石蜡切片能够得到胚囊发育结构的变化及生殖过程中的基本规律。

公开(公告)号：CN105838734A

公开(公告)日：2016-08-10

申请号：CN201610377504.4

申请日：2016-05-31

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李颖岳 ,  王欢 ,  庞晓明 ,  黄飞逸 ,  崔艳红 ,  侯璐

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00

CPC classification number: C12N15/8205

Abstract: 本发明涉及一种利用叶片为受体建立酸枣遗传转化体系的方法，属于植物细胞工程和分子生物学技术领域。将酸枣叶片接种于WPM不定芽启动培养基中暗培养诱导2～4d，得到外植体；将含有植物表达载体的农杆菌菌液侵染外植体，得到被侵染的外植体；将被侵染的外植体置于WPM固体培养基上，暗培养2～4d；将暗培养后的叶片转入WPM固体筛选培养基中进行暗培养，共暗培养14～16d后移至光下，在含0.1mg/L吲哚乙酸和0.5mg/L赤霉素的WPM培养基中进行叶片再生的伸长培养，得到不定芽，将不定芽转到MS培养基中进行扩繁，得到遗传转化后的酸枣植株。本发明提供的酸枣遗传转化体系方法为酸枣提供了合适的再生体系，且转化频率高，重复性高，有利于酸枣的遗传改良。