公开(公告)号：CN108410981B

公开(公告)日：2021-05-25

申请号：CN201810065764.7

申请日：2018-01-23

Applicant: 北京旌准医疗科技有限公司

Inventor： 於然 ,  刘明坤 ,  叶锋

IPC: C12Q1/6886

Abstract: 本发明涉及一种检测FLT3‑D835基因的试剂盒，包括：针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计的正向引物、针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计的反向引物、PCR反应液Mix、纯水、EcoRV内切核酸酶及内切核酸酶缓冲液；相较于传统的D835酶切方法，本发明在自行设计引物的基础上，通过设计和调整酶切反应体系中酶活力单位与扩增产物的比例，可以提高内切酶对特异性序列的识别度；通过将酶切产物进行适当的预处理，可以降低检出结果模棱两可的现象。通过本发明所提供的在D835酶切过程中进行适当设计和改进，可以有效降低甚至消除D835野生型序列的阳性检出率，并且使检出结果更加明晰，同时为临床标本检测时常出现的假阳性问题和结果不明问题提供了解决方案。

公开(公告)号：CN108410981A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810065764.7

申请日：2018-01-23

Applicant: 北京旌准医疗科技有限公司

Inventor： 於然 ,  刘明坤 ,  叶峰

IPC: C12Q1/6886

Abstract: 本发明涉及一种检测FLT3-D835基因的试剂盒，包括：针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计的正向引物、针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计的反向引物、PCR反应液Mix、纯水、EcoRV内切核酸酶及内切核酸酶缓冲液；相较于传统的D835酶切方法，本发明在自行设计引物的基础上，通过设计和调整酶切反应体系中酶活力单位与扩增产物的比例，可以提高内切酶对特异性序列的识别度；通过将酶切产物进行适当的预处理，可以降低检出结果模棱两可的现象。通过本发明所提供的在D835酶切过程中进行适当设计和改进，可以有效降低甚至消除D835野生型序列的阳性检出率，并且使检出结果更加明晰，同时为临床标本检测时常出现的假阳性问题和结果不明问题提供了解决方案。