布鲁氏菌的检测方法、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN106191286A

    公开(公告)日:2016-12-07

    申请号:CN201610617030.6

    申请日:2016-07-29

    Inventor: 叶锋 刘明坤 余荣

    Abstract: 本申请公开了布鲁氏菌的检测方法,包括如下步骤:采用离心柱法从血清标本中获取布鲁氏菌DNA,获得待测样本;PCR扩增反应;采用荧光定量PCR仪检测反应结果,荧光信号收集时设定为Taqman荧光探针BKV-FP 5’端荧光基团对应的荧光素,在60℃收集荧光信号;对结果分析。本申请还提供一种检测布鲁氏菌的试剂盒。本发明的检测方法、试剂盒敏感性高,最低检出可达到1000copies/mL;同时,本发明的检测方法的特异性很好,不和其他的细菌发生交叉反应,例如大肠杆菌、肠炎沙门菌、乙型肝炎病毒、人类疱疹病毒4型、人巨细胞病毒等。

    一种从血浆中分离游离核酸的方法

    公开(公告)号:CN106011131A

    公开(公告)日:2016-10-12

    申请号:CN201610617001.X

    申请日:2016-07-29

    Inventor: 叶锋 刘明坤 余荣

    CPC classification number: C12N15/1006 C12Q2523/308 C12Q2527/125

    Abstract: 本申请公开了一种从血浆中分离游离核酸的方法,该方法使用二氧化硅基质膜离心柱分离纯化游离核酸。与现有技术相比,本申请所述的血浆中分离游离核酸的方法,达到了如下效果:1、本发明的使用二氧化硅基质膜吸附柱从血浆样品中分离游离核酸的方法,可以同时将血浆样本,裂解缓冲液,Proteinase K和Acryl Carrier混合后进行吸附柱过滤,不仅简单快速,同时进行小体积洗脱,浓缩核酸。2、使用本发明提取核酸,无需有机提取,完全去除污染物和抑制剂使用既可以保证核酸的纯度,大大简化了从血浆中浓缩和纯化游离DNA和RNA的过程。

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