公开(公告)号：CN105154432B

公开(公告)日：2018-04-06

申请号：CN201510593450.0

申请日：2015-09-17

Applicant: 北京工业大学

Inventor： 马雪梅 ,  张鑫 ,  吕宝北 ,  赵鹏翔 ,  谢飞

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/04

Abstract: 一种用于扩增灰葡萄孢菌四个基因的方法及其多重PCR引物组涉及分子生物学领域。本发明是在已知灰葡萄孢菌对苯并咪唑类、啶酰菌胺类、异菌脲和环酰菌胺等多种杀菌剂的抗药性突变位点的基础上，建立的一种用于同时扩增β‑tub、BsOS1、erg27、SdhB四种基因片段的PCR引物组。本发明可直接采用提取的灰葡萄孢菌基因组作为模板，用设计的引物组对模板进行扩增，获得富集的四个基因片段。本发明是首次采用多重PCR方法对灰葡萄孢菌的四个抗药性突变基因进行同时扩增，为后期抗药位点的检测大大减少了工作量。本发明经过对PCR反应体系的优化，将四个基因片段在同一PCR反应中进行扩增。

公开(公告)号：CN106389462A

公开(公告)日：2017-02-15

申请号：CN201610219349.3

申请日：2016-04-10

Applicant: 北京工业大学

Inventor： 谢飞 ,  卢紫欣 ,  马雪梅 ,  李佳腊 ,  刘梦昱 ,  吕宝北 ,  赵鹏翔

IPC: A61K33/00 ,  A61P35/00

CPC classification number: A61K33/00

Abstract: 至少包含氢分子的液体/气体在制备抗原发性肝癌药物中的应用涉及用于抗肝癌的药，将至少包含氢分子的液体/气体用在抗肝癌药物的制备中，从而提高药物的抗肝癌效果。通过本发明所制备的抗肝癌的药含有至少包含氢分子的液体或气体。在该介质中既可以包含气体分子，如氧分子、二氧化碳分子等，还可以包含液体，如纯水、去离子水、蒸馏水、生理盐水、有机酸的酸性水溶液等。所制备的抗肝癌药具有抑制肝癌细胞生长、浸润和迁移的作用。

公开(公告)号：CN103725776B

公开(公告)日：2015-07-08

申请号：CN201310658832.8

申请日：2013-12-08

Applicant: 北京工业大学 ,  北京泰格瑞分子检验有限公司

Inventor： 谢飞 ,  吕宝北 ,  马雪梅 ,  江洪 ,  刘珊珊

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 一种基于ARMS的灰葡萄孢菌SdhB基因H272Y突变检测方法属于一种基因突变的实时荧光定量检测方法。该方法将real-time PCR技术与ARMS技术结合，通过特殊的引物设计，大大降低了引物二聚体对检测过程的干扰，提高了检测的灵敏度和准确率。同时，采用SYBR GreenⅠ染料法可以降低检测的成本。

公开(公告)号：CN103725776A

公开(公告)日：2014-04-16

申请号：CN201310658832.8

申请日：2013-12-08

Applicant: 北京工业大学 ,  北京泰格瑞分子检验有限公司

Inventor： 谢飞 ,  吕宝北 ,  马雪梅 ,  江洪 ,  刘珊珊

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

CPC classification number: C12Q1/6858 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2527/107 ,  C12Q2563/107

Abstract: 一种基于ARMS的灰葡萄孢菌SdhB基因H272Y突变检测方法属于一种基因突变的实时荧光定量检测方法。该方法将real-time PCR技术与ARMS技术结合，通过特殊的引物设计，大大降低了引物二聚体对检测过程的干扰，提高了检测的灵敏度和准确率。同时，采用SYBR GreenⅠ染料法可以降低检测的成本。

公开(公告)号：CN106119364A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610516197.3

申请日：2016-07-02

Applicant: 北京工业大学

Inventor： 马雪梅 ,  张鑫 ,  吕宝北 ,  赵鹏翔 ,  谢飞 ,  苏泽华

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q2535/125 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2563/107

Abstract: 一种基于悬浮芯片系统针对灰葡萄孢抗药相关位点的多重检测方法涉及分子生物学领域，具体涉及一种采用悬浮芯片系统，结合ASPE PCR方法针对与4种杀菌剂抗药性相关的灰霉抗药位点多重检测技术。本发明公开了一种基于悬浮芯片系统的针对灰葡萄孢抗药突变位点的多重检测方法。它是依次通过多重PCR、EXO/SAP处理PCR产物、多重ASPR PCR、带有生物素标记的ASPR PCR产物与磁珠杂交、Bio‑Plex 200系统检测五个步骤，来实现同时检测与四类杀菌剂抗药型相关基因型的目的。本发明具有高通量、灵敏度高、特异性好、重复性好、所需样本量少等优点。

公开(公告)号：CN105154432A

公开(公告)日：2015-12-16

申请号：CN201510593450.0

申请日：2015-09-17

Applicant: 北京工业大学

Inventor： 马雪梅 ,  张鑫 ,  吕宝北 ,  赵鹏翔 ,  谢飞

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/68

Abstract: 一种用于扩增灰葡萄孢菌四个基因的方法及其多重PCR引物组涉及分子生物学领域。本发明是在已知灰葡萄孢菌对苯并咪唑类、啶酰菌胺类、异菌脲和环酰菌胺等多种杀菌剂的抗药性突变位点的基础上，建立的一种用于同时扩增β-tub、BsOS1、erg27、SdhB四种基因片段的PCR引物组。本发明可直接采用提取的灰葡萄孢菌基因组作为模板，用设计的引物组对模板进行扩增，获得富集的四个基因片段。本发明是首次采用多重PCR方法对灰葡萄孢菌的四个抗药性突变基因进行同时扩增，为后期抗药位点的检测大大减少了工作量。本发明经过对PCR反应体系的优化，将四个基因片段在同一PCR反应中进行扩增。