公开(公告)号：CN110499375A

公开(公告)日：2019-11-26

申请号：CN201910806244.1

申请日：2019-08-28

Applicant: 北京大学首钢医院

Inventor： 闫琳琳 ,  胡守奎 ,  赵帆 ,  牛莉娜 ,  蔡煜 ,  吴蕾 ,  朱晓雪 ,  高乃姝 ,  农金轻 ,  邢喆

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/6804 ,  C12Q1/14 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及结合多交叉置换扩增和金纳米检测肺炎链球菌的方法，本发明提供的一种结合多交叉置换扩增和金纳米检测肺炎链球菌的方法，所述多交叉置换扩增MCDA中，含有多条引物，用以识别目标基因片段靶序列的多个区域，并对所述目标基因片段进行所述MCDA反应；在所述扩增引物C1的5’端标记半抗原荧光素，在所述扩增引物D1的5’端标记生物素，获得新标记的扩增引物C1*和D1*；采用所述扩增引物C1*和D1*，在Bst DNA聚合酶、链置换活性DNA聚合酶、其余引物存在下，使用所述目标基因片段作为模板恒温扩增DNA，获得含半抗原荧光素和生物素标记的双标MCDA基因片段；以所述双标MCDA基因片段作为检测物，采用金纳米检测方法对肺炎链球菌进行检测。

公开(公告)号：CN110819728A

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201910805561.1

申请日：2019-08-28

Applicant: 北京大学首钢医院

Inventor： 胡守奎 ,  闫琳琳 ,  赵帆 ,  牛莉娜 ,  蔡煜 ,  吴蕾 ,  朱晓雪 ,  高乃姝 ,  农金轻 ,  邢喆

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/6804 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种结合多交叉置换扩增和金纳米检测的检测技术及其在基因检测中的应用，本发明提供的一种结合多交叉置换扩增和金纳米检测的检测技术，通过在多交叉置换扩增中的扩增引物C1的5’端标记标记物，所述方法针对鲍曼不动杆菌特异基因pgaD(标记异硫氰酸荧光素FITC)及其碳青霉烯耐药基因blaOXA-23-like(标记异羟基洋地黄毒苷Dig)的扩增产物能被金纳米生物传感器可视化检测，所述方法便捷、快速、敏感、特异，适宜于推广应用于各种特异核苷酸片段的检测，及应用于该特异核苷酸片段对应的病原菌的检测。

公开(公告)号：CN108441540A

公开(公告)日：2018-08-24

申请号：CN201810170246.1

申请日：2018-03-01

Applicant: 北京大学首钢医院

Inventor： 赵帆 ,  胡守奎 ,  吴蕾 ,  农金轻 ,  高乃姝 ,  朱晓雪 ,  郑凤芝 ,  王春梅 ,  翟翼方 ,  刘铭义 ,  王静 ,  蔡煜 ,  袁平

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/385

Abstract: 本发明提供了一种铜绿假单胞菌的扩增引物组、应用及铜绿假单胞菌的检测方法，所述检测铜绿假单胞菌的方法，包括以下步骤：1)提取待检测铜绿假单胞菌样品的基因组；2)提供所述铜绿假单胞菌的特异基因oprL扩增引物组：CP1、CP2、F1、F2、D1、C1、R1、D2、C2、R2、C1*、C2*以及D1*、D2*；3)在包括所述扩增引物组的多交叉恒温扩增反应体系下，使用待检测铜绿假单胞菌样品的基因组核酸作为模板进行恒温扩增，得到扩增产物；4)使用金纳米生物传感器检测步骤3)的扩增产物。本发明所述方法以多交叉恒温扩增为基础，结合纳米生物检测技术，能够快捷，敏感，高特异性的鉴定铜绿假单胞菌。

公开(公告)号：CN108220398A

公开(公告)日：2018-06-29

申请号：CN201810170208.6

申请日：2018-03-01

Applicant: 北京大学首钢医院

Inventor： 胡守奎 ,  赵帆 ,  吴蕾 ,  农金轻 ,  高乃姝 ,  朱晓雪 ,  郑凤芝 ,  王春梅 ,  翟翼方 ,  刘铭义 ,  王静 ,  蔡煜 ,  袁平

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种肺炎克雷伯菌的扩增引物组、应用及肺炎克雷伯菌的检测方法，检测肺炎克雷伯菌的方法，包括以下步骤：1)提取待检测肺炎克雷伯菌样品的基因组；2)提供所述肺炎克雷伯菌的特异基因rcsA扩增引物组：CP1、CP2、F1、F2、D1、C1、R1、D2、C2、R2、C1*、C2*以及D1*、D2*；3)在包括所述扩增引物组的多交叉恒温扩增反应体系下，使用待检测肺炎克雷伯菌样品的基因组核酸作为模板进行恒温扩增，得到扩增产物；4)使用金纳米生物传感器检测步骤3)的扩增产物。本发明方法以多交叉恒温扩增为基础，结合纳米生物检测技术，能够快捷，敏感，高特异性的鉴定肺炎克雷伯菌。