发卡形探针基因芯片及其制备方法和检测方法

    公开(公告)号:CN1373228A

    公开(公告)日:2002-10-09

    申请号:CN02116302.2

    申请日:2002-03-22

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 赵新生 魏芳 孙豳

    Abstract: 本发明涉及一种基因芯片,包括芯片基底和固化在其上的寡聚核酸探针,探针包括探测区和茎杆区;茎杆区中的寡聚核酸序列和与其匹配的寡聚核酸序列形成发卡形双链结构,其核酸的匹配方式和碱基数目满足下列条件:发卡形寡聚核酸探针的解链温度,在单点错配杂交状态的解链温度-5℃到完全匹配杂交状态的解链温度+5℃的范围之间。本发明可通过对该基因芯片进行电位控制进一步优化杂交条件。本发明基因芯片和样品都无须作任何标记,芯片可以重复使用,制作和使用成本大大降低,且具有识别完全匹配和单点错配的寡聚核酸序列的能力。可广泛应用于生物技术领域。

    寡聚核苷酸嵌入染料荧光共振能量传递分子检测方法

    公开(公告)号:CN1749753A

    公开(公告)日:2006-03-22

    申请号:CN200410009575.6

    申请日:2004-09-17

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 赵新生 廖玮 郭素

    Abstract: 本发明将荧光共振能量传递(FRET)的技术引入到蛋白质芯片的制备和检测中。通过设计,使特异嵌入寡聚核苷酸双链而发光的染料分子,与目标分子上标记的荧光分子形成FRET的给体和受体。通过引入FRET,大大提高了蛋白芯片的特异性,是先识别后固定方法的延续和发展。本发明的一个目的是,提供一种基于荧光共振能量传递的蛋白质芯片,根据本发明的蛋白质芯片包括芯片基底和固化在其上的发卡形寡聚核苷酸,复合探针分子包括蛋白质以及与其相连的寡聚核苷酸,荧光标记的目标蛋白分子,和特异嵌入寡聚核苷酸双链而发光的染料分子。本发明的另一个目的在于,提供一种能够固定和检测蛋白质的方法。

    基因芯片电位扫描无标记荧光检测方法

    公开(公告)号:CN1215180C

    公开(公告)日:2005-08-17

    申请号:CN03142612.3

    申请日:2003-06-03

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 赵新生 魏芳

    Abstract: 本发明涉及一种基因芯片电位扫描无标记荧光检测方法,采用发卡形探针基因芯片,首先用标靶配制标准溶液,将标准溶液与探针杂交,并加入嵌入式荧光染料,对芯片基底施加电位和进行电位扫描,记录扫描下的探针与标准溶液杂交的荧光信号标准曲线;然后将待测样品DNA溶液装入荧光法测量芯片杂交的装置,与探针杂交,并加入嵌入式荧光染料;同样对芯片基底施加电位和进行电位扫描,记录扫描下的探针与待测样品杂交的荧光信号变化的曲线;将该曲线与标准曲线进行比较,给出识别结果。本发明可确切和可靠地实现SNP识别,探针和样品都无需进行特殊的标记,大大降低了成本。可广泛应用于生物芯片技术领域。

    溶液识别、表面寻址蛋白质芯片及其制备和检测方法

    公开(公告)号:CN100396790C

    公开(公告)日:2008-06-25

    申请号:CN200410009574.1

    申请日:2004-09-17

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 赵新生 廖玮 郭素

    Abstract: 本发明提供一种溶液识别、表面寻址的蛋白质芯片,根据本发明的蛋白质芯片包括芯片基底和固化在其上的发卡型寡聚核苷酸,探针分子包括蛋白质以及与其相连的寡聚核苷酸,荧光标记的目标蛋白分子,和特异嵌入寡聚核苷酸双链而发光的染料分子。芯片基底表面覆盖上一层末端为反应活性官能团的有机薄膜,通过共价键合,将寡聚核苷酸固定在基底表面。本发明还提供一种能够固定和检测蛋白质的方法,该方法利用发卡DNA以及电位控制技术耦联蛋白质分子,实现溶液中识别后到表面寻址,最大程度地避免蛋白质在表面的变性,并克服蛋白传感器和蛋白芯片无法长期保存的困难。

    一种蛋白质芯片
    5.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101086501A

    公开(公告)日:2007-12-12

    申请号:CN200610012193.8

    申请日:2006-06-09

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种蛋白质芯片。该蛋白质芯片,是由基片和表面展示有用作分子检测器的蛋白质的重组噬菌体组成,所述表面展示有用作分子检测器的蛋白质的重组噬菌体以微阵列固定在基片上。本发明将制作芯片的蛋白质展示于噬菌体上,使蛋白质得以克隆免除了分离纯化后处理,并可通过淘选获得各种特异功能的蛋白质克隆,而且还消除了芯片的表面影响,克服了当前蛋白质芯片技术的主要困难。本发明的新型噬菌体展示蛋白质芯片必将有更广泛的应用前景。

    基因芯片电位扫描无标记荧光检测方法

    公开(公告)号:CN1477210A

    公开(公告)日:2004-02-25

    申请号:CN03142612.3

    申请日:2003-06-03

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 赵新生 魏芳

    Abstract: 本发明涉及一种基因芯片电位扫描无标记荧光检测方法,采用发卡形探针基因芯片,首先用标靶配制标准溶液,将标准溶液与探针杂交,并加入嵌入式荧光染料,对芯片基底施加电位和进行电位扫描,记录扫描下的探针与标准溶液杂交的荧光信号标准曲线;然后将待测样品DNA溶液装入荧光法测量芯片杂交的装置,与探针杂交,并加入嵌入式荧光染料;同样对芯片基底施加电位和进行电位扫描,记录扫描下的探针与待测样品杂交的荧光信号变化的曲线;将该曲线与标准曲线进行比较,给出识别结果。本发明可确切和可靠地实现SNP识别,探针和样品都无需进行特殊的标记,大大降低了成本。可广泛应用于生物芯片技术领域。

    发卡形探针基因芯片及其制备方法和检测方法

    公开(公告)号:CN1176220C

    公开(公告)日:2004-11-17

    申请号:CN02116302.2

    申请日:2002-03-22

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 赵新生 魏芳 孙豳

    Abstract: 本发明涉及一种基因芯片,包括芯片基底和固化在其上的寡聚核酸探针,探针包括探测区和茎杆区;茎杆区中的寡聚核酸序列和与其匹配的寡聚核酸序列形成发卡形双链结构,其核酸的匹配方式和碱基数目满足下列条件:发卡形寡聚核酸探针的解链温度,在单点错配杂交状态的解链温度-5℃到完全匹配杂交状态的解链温度+5℃的范围之间。本发明可通过对该基因芯片进行电位控制进一步优化杂交条件。本发明基因芯片和样品都无须作任何标记,芯片可以重复使用,制作和使用成本大大降低,且具有识别完全匹配和单点错配的寡聚核酸序列的能力。可广泛应用于生物技术领域。

    寡聚核苷酸嵌入染料荧光共振能量传递分子检测方法

    公开(公告)号:CN100396791C

    公开(公告)日:2008-06-25

    申请号:CN200410009575.6

    申请日:2004-09-17

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 赵新生 廖玮 郭素

    Abstract: 本发明将荧光共振能量传递(FRET)的技术引入到蛋白质芯片的制备和检测中。通过设计,使特异嵌入寡聚核苷酸双链而发光的染料分子,与目标分子上标记的荧光分子形成FRET的给体和受体。通过引入FRET,大大提高了蛋白芯片的特异性,是先识别后固定方法的延续和发展。本发明的一个目的是,提供一种基于荧光共振能量传递的蛋白质芯片,根据本发明的蛋白质芯片包括芯片基底和固化在其上的发卡形寡聚核苷酸,复合探针分子包括蛋白质以及与其相连的寡聚核苷酸,荧光标记的目标蛋白分子,和特异嵌入寡聚核苷酸双链而发光的染料分子。本发明的另一个目的在于,提供一种能够固定和检测蛋白质的方法。

    溶液识别、表面寻址蛋白质芯片及其制备和检测方法

    公开(公告)号:CN1749752A

    公开(公告)日:2006-03-22

    申请号:CN200410009574.1

    申请日:2004-09-17

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 赵新生 廖玮 郭素

    Abstract: 本发明提供一种溶液识别、表面寻址的蛋白质芯片,根据本发明的蛋白质芯片包括芯片基底和固化在其上的发卡型寡聚核苷酸,探针分子包括蛋白质以及与其相连的寡聚核苷酸,荧光标记的目标蛋白分子,和特异嵌入寡聚核苷酸双链而发光的染料分子。芯片基底表面覆盖上一层末端为反应活性官能团的有机薄膜,通过共价键合,将寡聚核苷酸固定在基底表面。本发明还提供一种能够固定和检测蛋白质的方法,该方法利用发卡DNA以及电位控制技术耦联蛋白质分子,实现溶液中识别后到表面寻址,最大程度地避免蛋白质在表面的变性,并克服蛋白传感器和蛋白芯片无法长期保存的困难。

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