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公开(公告)号:CN107628937B
公开(公告)日:2020-11-06
申请号:CN201611262823.7
申请日:2016-12-30
Applicant: 北京大学
IPC: C07C49/84 , C07C45/64 , C07C235/84 , C07C231/12 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种蛋白质化学交联剂及所述蛋白质化学交联剂的制备方法。本发明提供的多功能交联剂水溶性以及稳定性均十分优异,且交联效率高,尤其是对精氨酸的交联效率高,是首次被广泛使用的精氨酸特异交联剂。本发明证明了所述交联剂对精氨酸的选择性,其与八个模式蛋白质和多亚基酵母蛋白复合物的交联反应证明了这些交联剂与精氨酸结合的有效性。化学交联与质谱分析结合技术是结构化学中一种有效且高速发展的技术,可以被有效地应用于大的活性蛋白质复合物分析,而不需要进行严格的纯化过程。由于交联剂多样的结构特点,这些交联剂展示出互补的反应性,其可交联的精氨酸残基彼此特异。
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公开(公告)号:CN110981715A
公开(公告)日:2020-04-10
申请号:CN201911066291.3
申请日:2019-11-04
Applicant: 北京大学
IPC: C07C47/546 , C07C45/29 , C07C47/575 , C07C223/02 , C07C221/00 , C07C233/31 , C07C231/12 , C07C317/44 , C07C315/04 , C07C49/84 , C07C45/64
Abstract: 本发明属于蛋白质及其功能研究技术领域,具体涉及一种蛋白质化学交联剂及其制备方法与应用。所述蛋白质化学交联剂,其结构如通式I所示。本发明所述的蛋白质化学交联剂具有反应迅速、不水解的优点,其应用于CXMS技术中展示出高效交联活性,对精氨酸和赖氨酸可以实现特异性识别。本发明所述蛋白质化学交联剂与六个模式蛋白质、十个蛋白混合物、多亚基酵母蛋白复合物、70S核糖体以及外泌体的交联反应证明了这些交联剂与赖氨酸结合的有效性,从而解决了现有交联剂类型不丰富,现有琥珀酰亚胺酯类交联剂在CXMS技术实际过程中存在的诸多问题,如易水解、选择性低以及交联反应较慢等问题。
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公开(公告)号:CN107129455B
公开(公告)日:2019-11-15
申请号:CN201610111473.8
申请日:2016-02-29
Applicant: 北京大学
IPC: C07D207/416 , C07D495/04 , G01N27/62
Abstract: 本发明涉及一种多功能化学交联剂,所述多功能化学交联剂是由两条反应官能团臂和一条包含亲和官能团和切割位点的臂组成的三臂式结构。本发明进一步提供了所述多功能化学交联剂的制备方法。本发明提供的多功能交联剂水溶性以及稳定性均十分优异,且交联效率高;将其应用于蛋白质分析时,不仅在简单体系如BSA、十个标准蛋白混合物的样品中展现出较好的交联肽段鉴定能力,而且在复杂生物样品中,例如大肠杆菌70S核糖体、大肠杆菌全细胞裂解液以及秀丽隐杆线虫全细胞裂解液都可以鉴定到可观的交联位点,展现出很好的应用价值,为今后研究复杂生物体系蛋白相互作用提供一个强有力的工具。
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公开(公告)号:CN110981715B
公开(公告)日:2021-08-10
申请号:CN201911066291.3
申请日:2019-11-04
Applicant: 北京大学
IPC: C07C47/546 , C07C45/29 , C07C47/575 , C07C223/02 , C07C221/00 , C07C233/31 , C07C231/12 , C07C317/44 , C07C315/04 , C07C49/84 , C07C45/64
Abstract: 本发明属于蛋白质及其功能研究技术领域,具体涉及一种蛋白质化学交联剂及其制备方法与应用。所述蛋白质化学交联剂,其结构如通式I所示。本发明所述的蛋白质化学交联剂具有反应迅速、不水解的优点,其应用于CXMS技术中展示出高效交联活性,对精氨酸和赖氨酸可以实现特异性识别。本发明所述蛋白质化学交联剂与六个模式蛋白质、十个蛋白混合物、多亚基酵母蛋白复合物、70S核糖体以及外泌体的交联反应证明了这些交联剂与赖氨酸结合的有效性,从而解决了现有交联剂类型不丰富,现有琥珀酰亚胺酯类交联剂在CXMS技术实际过程中存在的诸多问题,如易水解、选择性低以及交联反应较慢等问题。
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公开(公告)号:CN107129455A
公开(公告)日:2017-09-05
申请号:CN201610111473.8
申请日:2016-02-29
Applicant: 北京大学
IPC: C07D207/416 , C07D495/04 , G01N27/62
Abstract: 本发明涉及一种多功能化学交联剂,所述多功能化学交联剂是由两条反应官能团臂和一条包含亲和官能团和切割位点的臂组成的三臂式结构。本发明进一步提供了所述多功能化学交联剂的制备方法。本发明提供的多功能交联剂水溶性以及稳定性均十分优异,且交联效率高;将其应用于蛋白质分析时,不仅在简单体系如BSA、十个标准蛋白混合物的样品中展现出较好的交联肽段鉴定能力,而且在复杂生物样品中,例如大肠杆菌70S核糖体、大肠杆菌全细胞裂解液以及秀丽隐杆线虫全细胞裂解液都可以鉴定到可观的交联位点,展现出很好的应用价值,为今后研究复杂生物体系蛋白相互作用提供一个强有力的工具。
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公开(公告)号:CN107652316B
公开(公告)日:2020-01-03
申请号:CN201710762736.6
申请日:2017-08-30
Applicant: 北京大学
IPC: C07F7/08 , C07C269/06 , C07C271/22 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种蛋白质化学交联剂,其结构如通式I所示;本发明同时涉及所述蛋白质化学交联剂的制备方法。本发明提供的多功能交联剂交联效率和稳定性都很好,尤其是基于三甲基硅基重氮甲基功能团类型的交联剂,对天冬氨酸和谷氨酸的侧链羧基以及蛋白质的碳端羧基的交联效率很高,是首例无需加入缩合剂活化的基于含有羧基的氨基酸残基选择性的交联剂。本发明通过对N‑(Boc)谷氨酸甲酯以及对含多种氨基酸的多肽的交联反应证明所述交联剂了对含有羧酸氨基酸残基有很高的交联效率及选择性,其与九种模式蛋白质和一种含有八种蛋白的混合物的交联反应证明了该类交联剂与含有羧基的氨基酸残基的简单纯蛋白体以及复杂的蛋白体系都具有很高的交联效率。R1‑X‑R2‑‑I。
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公开(公告)号:CN107652316A
公开(公告)日:2018-02-02
申请号:CN201710762736.6
申请日:2017-08-30
Applicant: 北京大学
IPC: C07F7/08 , C07C269/06 , C07C271/22 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种蛋白质化学交联剂,其结构如通式I所示;本发明同时涉及所述蛋白质化学交联剂的制备方法。本发明提供的多功能交联剂交联效率和稳定性都很好,尤其是基于三甲基硅基重氮甲基功能团类型的交联剂,对天冬氨酸和谷氨酸的侧链羧基以及蛋白质的碳端羧基的交联效率很高,是首例无需加入缩合剂活化的基于含有羧基的氨基酸残基选择性的交联剂。本发明通过对N-(Boc)谷氨酸甲酯以及对含多种氨基酸的多肽的交联反应证明所述交联剂了对含有羧酸氨基酸残基有很高的交联效率及选择性,其与九种模式蛋白质和一种含有八种蛋白的混合物的交联反应证明了该类交联剂与含有羧基的氨基酸残基的简单纯蛋白体以及复杂的蛋白体系都具有很高的交联效率。R1-X-R2--I。
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公开(公告)号:CN107628937A
公开(公告)日:2018-01-26
申请号:CN201611262823.7
申请日:2016-12-30
Applicant: 北京大学
IPC: C07C49/84 , C07C45/64 , C07C235/84 , C07C231/12 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种蛋白质化学交联剂及所述蛋白质化学交联剂的制备方法。本发明提供的多功能交联剂水溶性以及稳定性均十分优异,且交联效率高,尤其是对精氨酸的交联效率高,是首次被广泛使用的精氨酸特异交联剂。本发明证明了所述交联剂对精氨酸的选择性,其与八个模式蛋白质和多亚基酵母蛋白复合物的交联反应证明了这些交联剂与精氨酸结合的有效性。化学交联与质谱分析结合技术是结构化学中一种有效且高速发展的技术,可以被有效地应用于大的活性蛋白质复合物分析,而不需要进行严格的纯化过程。由于交联剂多样的结构特点,这些交联剂展示出互补的反应性,其可交联的精氨酸残基彼此特异。
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