公开(公告)号：CN107177592B

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN201610134656.1

申请日：2016-03-10

Applicant: 北京大学

Inventor： 夏青 ,  王天畅 ,  杨琦

IPC: C12N15/113 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明涉及利用构建抑制性tRNA延长致病基因无义突变体的截短蛋白，使哺乳动物细胞中产生全长有功能的蛋白，从而恢复突变体的正常结构和功能。发明中涉及无义突变的体系包括单基因遗传病的致病基因和肿瘤细胞内的肿瘤抑制基因。本发明主要涉及构筑对应三种终止密码子的19种抑制性tRNA，在哺乳动物细胞中高效通读dystrophin蛋白，并在肿瘤细胞通读无义突变蛋白，作用显著。

公开(公告)号：CN107177592A

公开(公告)日：2017-09-19

申请号：CN201610134656.1

申请日：2016-03-10

Applicant: 北京大学

Inventor： 夏青 ,  王天畅 ,  杨琦

IPC: C12N15/113 ,  A61P35/00

CPC classification number: A61K48/00 ,  C12N15/113 ,  C12N15/1135 ,  C12N2310/10

Abstract: 本发明涉及利用构建抑制性tRNA延长致病基因无义突变体的截短蛋白，使哺乳动物细胞中产生全长有功能的蛋白，从而恢复突变体的正常结构和功能。发明中涉及无义突变的体系包括单基因遗传病的致病基因和肿瘤细胞内的肿瘤抑制基因。本发明主要涉及构筑对应三种终止密码子的19种抑制性tRNA，在哺乳动物细胞中高效通读dystrophin蛋白，并在肿瘤细胞通读无义突变蛋白，作用显著。

公开(公告)号：CN107022568A

公开(公告)日：2017-08-08

申请号：CN201610068626.5

申请日：2016-02-01

Applicant: 北京大学

Inventor： 周德敏 ,  夏青 ,  徐欢 ,  张子威 ,  吴一鸣 ,  王天畅 ,  王妍 ,  张礼和

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/11 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C07K14/18 ,  C12N15/51

Abstract: 本发明提供了在哺乳动物细胞中高效多点插入非天然氨基酸的系统，所述系统包括表达含有非天然氨基酸的蛋白质的表达载体，所述非天然氨基酸由密码子UAG编码以及含有古甲烷球菌的tRNA(tRNAPyl)和吡咯赖氨酰-tRNA合成酶(PylRS)基因的载体，所述系统中还包括包含经突变的eRF1的细胞系。此外，还提供了利用该系统制备定点突变的蛋白的方法。

公开(公告)号：CN107022568B

公开(公告)日：2020-08-25

申请号：CN201610068626.5

申请日：2016-02-01

Applicant: 北京大学

Inventor： 周德敏 ,  夏青 ,  徐欢 ,  张子威 ,  吴一鸣 ,  王天畅 ,  王妍 ,  张礼和

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/11 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C07K14/18 ,  C12N15/51

Abstract: 本发明提供了在哺乳动物细胞中高效多点插入非天然氨基酸的系统，所述系统包括表达含有非天然氨基酸的蛋白质的表达载体，所述非天然氨基酸由密码子UAG编码以及含有古甲烷球菌的tRNA(tRNAPyl)和吡咯赖氨酰‑tRNA合成酶(PylRS)基因的载体，所述系统中还包括包含经突变的eRF1的细胞系。此外，还提供了利用该系统制备定点突变的蛋白的方法。