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公开(公告)号:CN103487393A
公开(公告)日:2014-01-01
申请号:CN201310481432.4
申请日:2013-10-15
Applicant: 北京大学
IPC: G01N21/31
Abstract: 本发明公开了一种蛋白质快速定量方法,将目的蛋白与铁氧还蛋白rubredoxin的融合蛋白在宿主菌中表达,利用rubredoxin的吸收光谱特性,直接测定宿主菌裂解后的上清中融合蛋白的含量。该方法不仅可用于检测目的蛋白的可溶表达量,还可以用于筛选合适的蛋白表达条件,以及实时监测目的蛋白的表达情况。本发明方法定量准确,操作简便快速,成本低廉,且适用范围广泛,不受仪器和试剂限制。
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公开(公告)号:CN103487393B
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201310481432.4
申请日:2013-10-15
Applicant: 北京大学
IPC: G01N21/31
Abstract: 本发明公开了一种蛋白质快速定量方法,将目的蛋白与铁氧还蛋白rubredoxin的融合蛋白在宿主菌中表达,利用rubredoxin的吸收光谱特性,直接测定宿主菌裂解后的上清中融合蛋白的含量。该方法不仅可用于检测目的蛋白的可溶表达量,还可以用于筛选合适的蛋白表达条件,以及实时监测目的蛋白的表达情况。本发明方法定量准确,操作简便快速,成本低廉,且适用范围广泛,不受仪器和试剂限制。
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公开(公告)号:CN103554245A
公开(公告)日:2014-02-05
申请号:CN201310481574.0
申请日:2013-10-15
Applicant: 北京大学
CPC classification number: C07K14/47 , C07K2319/21 , C07K2319/50
Abstract: 本发明公开了一种融合标签蛋白。本发明的融合标签蛋白是在野生型HREVl07(1—125)蛋白的C89S突变体(记为HREVl07N)基础上构建的,包括SEQ ID No:1所示氨基酸序列的HREVl07N,以及在其P38-K57无规卷曲区域中插入的两段Linker和这两段Linker之间的多克隆位点对应短肽。本发明进一步提供了一种融合蛋白表达系统,包括编码所述融合标签蛋白的核酸分子,目的蛋白基因插入到所述多克隆位点中,在融合标签蛋白的C端还可以再连接rubredoxin标签蛋白和His标签,以利于融合蛋白的表达和纯化。
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公开(公告)号:CN103554245B
公开(公告)日:2014-12-31
申请号:CN201310481574.0
申请日:2013-10-15
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种融合标签蛋白。本发明的融合标签蛋白是在野生型HREVl07(1—125)蛋白的C89S突变体(记为HREVl07N)基础上构建的,包括SEQ ID No:1所示氨基酸序列的HREVl07N,以及在其P38-K57无规卷曲区域中插入的两段Linker和这两段Linker之间的多克隆位点对应短肽。本发明进一步提供了一种融合蛋白表达系统,包括编码所述融合标签蛋白的核酸分子,目的蛋白基因插入到所述多克隆位点中,在融合标签蛋白的C端还可以再连接rubredoxin标签蛋白和His标签,以利于融合蛋白的表达和纯化。
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