公开(公告)号：CN119662618A

公开(公告)日：2025-03-21

申请号：CN202411557741.X

申请日：2024-11-04

Applicant: 北京大学

Inventor： 雷晓光 ,  高磊 ,  王海军 ,  柯翰

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/82 ,  C12N15/60 ,  C12P17/02 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，提供一种氧杂环丁烷合成酶突变体及其应用。氧杂环丁烷合成酶TOT是催化紫杉醇骨架结构中氧杂四元环形成的关键基因，然而该酶在氧化底物生成氧杂四元环的同时还伴随着副反应的发生，因此紫杉醇的生物合成过程中面临着合成效率低，分离纯化难等问题。本发明通过同源建模和分子动力学模拟，找到了TOT控制产物路径和比例的关键残基，并通过理性设计成功提高了TOT在合成氧杂环丁烷结构的效率。本发明提供的TOT突变体有助于提高紫杉醇的生物合成效率，为通过酶催化和合成生物学的手段实现紫杉烷类药物的工业制备提供了更好的催化工具。