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公开(公告)号:CN1059703C
公开(公告)日:2000-12-20
申请号:CN93103997.5
申请日:1993-04-10
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明是一种人胰岛素的基因工程生产方法。本法采用了大肠杆菌表达体系,实现了编码人胰岛素前体基因的直接表达,排除了传统采用的融合方式表达,给后加工带来了极大的方便。本法的表达率在20-30%,经细胞破碎分离包含体,包含体溶解,二硫键还原及重组,只经一根分子筛柱就可得纯度大于90%的人胰岛素前体。此产物可直接用胰酶转肽转为人胰岛素,产品的化学结构、生物活性,与人胰岛素相同。
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公开(公告)号:CN1075983A
公开(公告)日:1993-09-08
申请号:CN93103997.5
申请日:1993-04-10
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明是一种人胰岛素的基因工程生产方法。本法采用了大肠杆菌表达体系,实现了编码人胰岛素前体基因的直接表达,排除了传统采用的融合方式表达,给后加工带来了极大的方便。本法的表达率在20—30%,经细胞破碎分离包含体,包含体溶解,二硫键还原及重组,只经一根分子筛柱就可得纯度大于90%的人胰岛素前体。此产物可直接用胰酶转肽转为人胰岛素,产品的化学结构、生物活性,与人胰岛素相同。
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公开(公告)号:CN1110318C
公开(公告)日:2003-06-04
申请号:CN99109419.0
申请日:1999-06-30
Applicant: 北京大学
Abstract: 胰岛素原的C肽构象与天然蛇毒去整合素中RGD序列的构象相似,B链末端B30位点与A链A1位点之间空间距离约为7.5埃。因此设计嵌合RGD序列为:CRGDSC,该序列取自纤维粘接蛋白,一种血源性的与血小板整合素有较强亲和力的多肽,能表现较强抗拴活性功能的RGD序列。用于接构建重组抗拴多肽的模板基因为Cys A6 Ser,Cys All Ser胰岛素原基因。所应用的基因工程方法是PCR方法的多步组合。
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公开(公告)号:CN1245719A
公开(公告)日:2000-03-01
申请号:CN99109419.0
申请日:1999-06-30
Applicant: 北京大学
Abstract: 胰岛素原的C肽构象与天然蛇毒去整合素中RGD序列的构象相似,B链末端B30位点与A链Al位点之间空间距离约为7.5埃。因此设计嵌合RGD序列为:CRGDSC,该序列取自纤维粘接蛋白,一种血源性的与血小板整合素有较强亲和力的多肽,能表现较强抗拴活性功能的RGD序列。用于接构建重组抗拴多肽的模板基因为Cys A6 Ser,Cys All Ser胰岛素原基因。所应用的基因工程方法是PCR方法的多步组合。
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