公开(公告)号：CN111073925B

公开(公告)日：2022-04-26

申请号：CN201910995483.6

申请日：2019-10-18

Applicant: 北京大学

Inventor： 张文彬 ,  吴夏泠 ,  刘雅杰 ,  刘栋

IPC: C12P21/00 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C12N9/06

Abstract: 本发明公布了一种基于无序蛋白偶联酶的高效多肽‑多肽偶联系统和方法。通过设计拆分蛋白质结构域CnaB2并进行优化，得到三组分体系：谍标签(SpyTag)、BD标签(BDTag)和谍订书机酶(SpyStapler)，使得SpyStapler可以催化SpyTag与BDTag之间的偶联反应，并制备含有SpyTag和BDTag两个标签的不同的融合蛋白质并进行偶联或环化反应。基于本发明的多肽‑多肽偶联系统，可以利用基因编码的方式获得纯度高且功能稳定的活性蛋白质；谍订书机酶偶联谍标签和BD标签反应效率高，且反应后部分谍订书机酶脱落，得到的环化产物的偶联部分分子量较小。本发明的蛋白质标签适用于多种功能蛋白质及可以融合表达于蛋白质的任意位置。

公开(公告)号：CN111073925A

公开(公告)日：2020-04-28

申请号：CN201910995483.6

申请日：2019-10-18

Applicant: 北京大学

Inventor： 张文彬 ,  吴夏泠 ,  刘雅杰 ,  刘栋

IPC: C12P21/00 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C12N9/06

Abstract: 本发明公布了一种基于无序蛋白偶联酶的高效多肽-多肽偶联系统和方法。通过设计拆分蛋白质结构域CnaB2并进行优化，得到三组分体系：谍标签(SpyTag)、BD标签(BDTag)和谍订书机酶(SpyStapler)，使得SpyStapler可以催化SpyTag与BDTag之间的偶联反应，并制备含有SpyTag和BDTag两个标签的不同的融合蛋白质并进行偶联或环化反应。基于本发明的多肽-多肽偶联系统，可以利用基因编码的方式获得纯度高且功能稳定的活性蛋白质；谍订书机酶偶联谍标签和BD标签反应效率高，且反应后部分谍订书机酶脱落，得到的环化产物的偶联部分分子量较小。本发明的蛋白质标签适用于多种功能蛋白质及可以融合表达于蛋白质的任意位置。