公开(公告)号：CN112501264A

公开(公告)日：2021-03-16

申请号：CN202011418447.2

申请日：2020-12-07

Applicant: 北京城市排水集团有限责任公司

Inventor： 陈刚新 ,  卢紫欣 ,  李魁晓 ,  张春蕊 ,  齐羽 ,  吴从从 ,  张树军 ,  蒋勇

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/06

Abstract: 本发明属于污水检测技术领域，涉及一种污染物中氨氧化细菌的定量方法。包括以下步骤：i)构建含有氨氧化细菌的DNA片段的质粒；ii)将质粒导入感受态细胞中，并进行扩繁、质粒提取、梯度稀释，获得不同浓度的质粒；iii)从污染物中提取DNA；iv)对不同浓度的质粒和步骤iii)获得的DNA进行荧光定量PCR，得到不同浓度的质粒分别对应的荧光强度和DNA对应的荧光强度；v)根据不同浓度的质粒以及每个浓度的质粒对应的荧光强度，绘制标准曲线；vi)根据标准曲线和样品DNA对应的荧光强度，计算所述污染物中氨氧化细菌的含量。本发明提供的检测氨氧化细菌的方法具有重复性好、特异性强、灵敏度高、操作过程简便等优点，大幅度提高了检测效率。

公开(公告)号：CN114032293A

公开(公告)日：2022-02-11

申请号：CN202111580698.5

申请日：2021-12-22

Applicant: 北京城市排水集团有限责任公司

Inventor： 陈刚新 ,  卢紫欣 ,  王国安 ,  李魁晓 ,  王佳伟 ,  陈沉 ,  张春蕊

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/10 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于污水检测技术领域，涉及一种污泥中硝化杆菌属细菌的定量检测方法及应用。包括以下步骤：i)构建硝化杆菌属细菌DNA片段的质粒；ii)将质粒导入感受态细胞中，扩繁、质粒提取、梯度稀释，获得不同浓度的质粒；iii)从污泥中提取DNA；iv)得到不同浓度的质粒达到一定荧光强度分别对应的循环数和DNA对应的循环数；v)绘制标准曲线；vi)计算污泥中硝化杆菌属细菌的浓度。本发明提供的检测硝化杆菌属细菌的方法具有重复性好、特异性强、灵敏度高、操作过程简便等优点，大幅度提高了检测效率。