一种基于CRISPR-Cas12a的MOF-DNA水凝胶比色检测试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN112342273B

    公开(公告)日:2022-11-15

    申请号:CN202011254399.8

    申请日:2020-11-11

    Abstract: 本发明属于生物检测领域,涉及一种基于CRISPR‑Cas12a的MOF‑DNA水凝胶比色检测试剂盒及方法。该方法包括以下步骤:S1.制备DNA水凝胶‑MOF;S2.将MMPs‑APT和互补寡核苷酸cDNA的溶液杂交,得到MMPs‑apt‑cDNA;磁分离除去未反应的cDNA并重悬;将样品溶液与MMPs‑apt‑cDNA重悬液孵育;通过磁分离收集解离的cDNA;S3.将cDNA进行CHA等温扩增;S4.将Cas 12a、crRNA和Cas 12a配套缓冲液孵育,加入DNA水凝胶‑MOF和等温扩增产物,得到切割后的水凝胶;S5.将切割后的水凝胶进行显色并检测。本发明突破了基于CRISPR‑Cas12a的传感器都只用于核酸检测的限制,将其结合DNA水凝胶,成功应用于雌二醇小分子目标物的检测。

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