公开(公告)号：CN109913496A

公开(公告)日：2019-06-21

申请号：CN201910276234.1

申请日：2019-04-08

Applicant: 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

Inventor： 高玉伟 ,  赵梦琳 ,  孙伟洋 ,  于志君 ,  王铁成 ,  冯娜 ,  赵永坤 ,  张雪梅 ,  杨松涛 ,  夏咸柱

IPC: C12N15/85 ,  C12N7/01 ,  C12N7/04 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种含有A/B型嵌合HA质粒的嵌合病毒株和嵌合减毒株拯救方法，先对H5亚型流感2.3.4.4谱系的HA序列进行碱性裂解位点改造，使其由高致病性病毒变为低致病性病毒，然后合成H5亚型流感2.3.4.4谱系的HA基因，以合成的HA基因和构建好的pBD-Ya1688-HA转染质粒为模板，设计并合成构建A/B型嵌合HA质粒的扩增引物，其次采用无缝克隆方法将H5亚型流感病毒的HA基因定向克隆到pBD-Ya1688-HA转染质粒中，形成A/B型嵌合HA质粒，最后利用A/B型嵌合HA质粒拯救含有A/B型嵌合HA质粒的嵌合病毒株和嵌合减毒株。解决了流感减毒疫苗容易引起毒力返祖的问题。