Fc结合性蛋白质及其制造方法

    公开(公告)号:CN103038344B

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201180023599.5

    申请日:2011-03-10

    CPC classification number: C07K14/70535 C07K1/22 C07K17/08 C07K2319/21

    Abstract: 本发明提供与野生型相比对热、酸和/或碱的稳定性提高的Fc结合性蛋白质及其制造方法,此外,还提供将该蛋白质用作亲和色谱用配体,特异性地分离包含Fc结合性蛋白质结合位点的蛋白质的方法。解决方法:通过将野生型人Fc受体的处于细胞外区域的1个以上的特定氨基酸残基取代成其他氨基酸残基,能够得到与野生型人Fc受体相比、对热、酸和/或碱的稳定性提高的Fc结合性蛋白质。本发明的Fc结合性蛋白质通过例如固定化于固相,作为亲和色谱用配体是有用的。此外,使用包含编码本发明的Fc结合性蛋白质的多核苷酸的表达载体转化的宿主,表达该蛋白质,则与使用野生型人Fc受体的情况相比,蛋白质的生产量提高。

    改良型重组FcγRII
    2.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109715800A

    公开(公告)日:2019-05-03

    申请号:CN201780058075.7

    申请日:2017-09-21

    Abstract: 本发明的课题在于,提供不需要重折叠、并且生产率和热稳定性高的改良型重组FcγRIIb及FcγRIIa、以及其制造方法。通过改良型重组FcγRIIb来解决上述课题,所述改良型重组FcγRIIb至少含有人FcγRIIb的细胞外区域(UniProt No.P31994的第43位至第215位)的氨基酸残基,其中,在该氨基酸残基中,发生与UniProt No.P31994的第82位、第94位、第98位、第104位、第105位及第139位相当的位置的氨基酸置换中的至少一个以上。通过改良型重组FcγRIIa来解决上述课题,所述改良型重组FcγRIIa至少含有人FcγRIIa的细胞外区域(UniProt No.P12318-1的第34位至第206位)的氨基酸残基,其中,在该氨基酸残基中,发生与UniProt No.P12318-1的第73位、第85位、第89位、第95位、第96位及第130位相当的位置的氨基酸置换中的至少一个以上。

    改良型重组FcγRII
    3.
    发明授权

    公开(公告)号:CN109715800B

    公开(公告)日:2022-08-23

    申请号:CN201780058075.7

    申请日:2017-09-21

    Abstract: 本发明的课题在于,提供不需要重折叠、并且生产率和热稳定性高的改良型重组FcγRIIb及FcγRIIa、以及其制造方法。通过改良型重组FcγRIIb来解决上述课题,所述改良型重组FcγRIIb至少含有人FcγRIIb的细胞外区域(UniProt No.P31994的第43位至第215位)的氨基酸残基,其中,在该氨基酸残基中,发生与UniProt No.P31994的第82位、第94位、第98位、第104位、第105位及第139位相当的位置的氨基酸置换中的至少一个以上。通过改良型重组FcγRIIa来解决上述课题,所述改良型重组FcγRIIa至少含有人FcγRIIa的细胞外区域(UniProt No.P12318‑1的第34位至第206位)的氨基酸残基,其中,在该氨基酸残基中,发生与UniProt No.P12318‑1的第73位、第85位、第89位、第95位、第96位及第130位相当的位置的氨基酸置换中的至少一个以上。

    Fc结合性蛋白质及其制造方法

    公开(公告)号:CN103038344A

    公开(公告)日:2013-04-10

    申请号:CN201180023599.5

    申请日:2011-03-10

    CPC classification number: C07K14/70535 C07K1/22 C07K17/08 C07K2319/21

    Abstract: 本发明提供与野生型相比对热、酸和/或碱的稳定性提高的Fc结合性蛋白质及其制造方法,此外,还提供将该蛋白质用作亲和色谱用配体,特异性地分离包含Fc结合性蛋白质结合位点的蛋白质的方法。解决方法:通过将野生型人Fc受体的处于细胞外区域的1个以上的特定氨基酸残基取代成其他氨基酸残基,能够得到与野生型人Fc受体相比、对热、酸和/或碱的稳定性提高的Fc结合性蛋白质。本发明的Fc结合性蛋白质通过例如固定化于固相,作为亲和色谱用配体是有用的。此外,使用用包含编码本发明的Fc结合性蛋白质的多核苷酸的表达载体转化的宿主,表达该蛋白质,则与使用野生型人Fc受体的情况相比,蛋白质的生产量提高。

    岩藻糖结合性蛋白、其制造方法、和其用途

    公开(公告)号:CN112567040B

    公开(公告)日:2024-08-13

    申请号:CN201980053559.1

    申请日:2019-08-08

    Abstract: 课题在于,提供在大肠埃希氏菌等宿主中表达时的生产率、包含由Fucα1‑2Galβ1‑3GlcNAc和/或Fucα1‑2Galβ1‑3GalNAc构成的结构的糖链等含岩藻糖糖链的结合亲和性、和/或对热的稳定性得到提高的岩藻糖结合性蛋白。通过下述方式来解决所述课题:在序列号1所示的岩藻糖结合性蛋白BC2LCN的氨基酸序列中,使C末端侧的多个氨基酸残基缺失;以及,根据需要将序列号1中的第36位的甘氨酸残基置换为半胱氨酸残基,将序列号1中的第39位的谷氨酰胺残基置换为亮氨酸残基或甲硫氨酸残基,将序列号1中的第65位的谷氨酰胺残基置换为亮氨酸残基,将序列号1中的第72位的半胱氨酸残基置换为甘氨酸残基或丙氨酸残基,将序列号1中的第81位的谷氨酸残基置换为半胱氨酸残基、谷氨酰胺残基、组氨酸残基、或甲硫氨酸残基;和作为序列号1中的第36位而指定的甘氨酸残基置换为半胱氨酸残基。

    岩藻糖结合性蛋白、其制造方法、和其用途

    公开(公告)号:CN112567040A

    公开(公告)日:2021-03-26

    申请号:CN201980053559.1

    申请日:2019-08-08

    Abstract: 课题在于,提供在大肠埃希氏菌等宿主中表达时的生产率、包含由Fucα1‑2Galβ1‑3GlcNAc和/或Fucα1‑2Galβ1‑3GalNAc构成的结构的糖链等含岩藻糖糖链的结合亲和性、和/或对热的稳定性得到提高的岩藻糖结合性蛋白。通过下述方式来解决所述课题:在序列号1所示的岩藻糖结合性蛋白BC2LCN的氨基酸序列中,使C末端侧的多个氨基酸残基缺失;以及,根据需要将序列号1中的第36位的甘氨酸残基置换为半胱氨酸残基,将序列号1中的第39位的谷氨酰胺残基置换为亮氨酸残基或甲硫氨酸残基,将序列号1中的第65位的谷氨酰胺残基置换为亮氨酸残基,将序列号1中的第72位的半胱氨酸残基置换为甘氨酸残基或丙氨酸残基,将序列号1中的第81位的谷氨酸残基置换为半胱氨酸残基、谷氨酰胺残基、组氨酸残基、或甲硫氨酸残基;和作为序列号1中的第36位而指定的甘氨酸残基置换为半胱氨酸残基。

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