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公开(公告)号:CN117999271A
公开(公告)日:2024-05-07
申请号:CN202280052457.X
申请日:2022-07-22
Applicant: 俄勒冈州普罗维登斯健康与服务部 , 株式会社岛津制作所
IPC: C07K2/00
Abstract: 一种鉴定生物学样品中所含的源自已知母肽的未知剪接肽的方法,其包括:(1)第1步骤,对上述样品实施质谱分析,由此得到上述样品中所含的肽的质谱分析数据;(2)第2步骤,从作为已知氨基酸序列的数据库的初级文库中检索与上述质谱分析数据匹配的氨基酸序列,鉴定上述样品中所含的上述母肽;(3)第3步骤,制作包含由所鉴定出的上述母肽可能产生的剪接肽的候补群的次级文库;和(4)第4步骤,从上述次级文库中检索与上述质谱分析数据匹配的氨基酸序列,鉴定上述样品中所含的上述剪接肽。
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公开(公告)号:CN111512152A
公开(公告)日:2020-08-07
申请号:CN201780097953.6
申请日:2017-12-28
Applicant: 株式会社岛津制作所
Abstract: 本发明提供一种样品中的单克隆抗体的检测方法,所述方法包括以下的步骤:(a)捕捉样品中的单克隆抗体并固定化于多孔体的细孔内的步骤;(b)使固定化有该单克隆抗体的多孔体与固定化有蛋白酶的纳米颗粒接触而进行单克隆抗体的选择性蛋白酶解的步骤;及(c)通过液相色谱质谱分析(LC-MS)来检测利用选择性蛋白酶解而得到的肽片段的步骤,在步骤(a)之后,还包括(a’)进行在酸性条件下的还原反应的步骤。根据本发明,可以期待使用了质谱分析的单克隆抗体的检测方法的进一步的应用。
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公开(公告)号:CN107406841A
公开(公告)日:2017-11-28
申请号:CN201580077541.7
申请日:2015-12-18
Applicant: 株式会社岛津制作所
Abstract: 本发明的课题在于,提供一种能够用于蛋白质的质谱分析用样品的制备的、对外部环境变化的稳定性优异的高活性的固定化蛋白酶。根据本发明,可提供一种固定化蛋白酶及其制造方法,其特征在于,在纳米颗粒表面固定有粗纯化的蛋白酶或未进行耐自体分解处理的蛋白酶。本发明的固定化蛋白酶能够不受外部环境变化的影响地维持高活性,因此例如对供于临床被检体中的蛋白质质谱分析的样品的制备有效。
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公开(公告)号:CN111630379B
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN201780097812.4
申请日:2017-12-28
Applicant: 株式会社岛津制作所
Abstract: 本发明提供一种样品中的单克隆抗体的检测方法,该方法包括以下步骤:(a)捕捉样品中的单克隆抗体并将其固定在多孔体的细孔内的步骤;(b)使固定有该单克隆抗体的多孔体与固定有蛋白酶的纳米颗粒接触,用30分钟以上进行单克隆抗体的选择性蛋白酶消化的步骤;以及(c)通过液相色谱质谱联用(LC‑MS)对由选择性蛋白酶消化得到的肽片段进行检测的步骤,在反应开始初期的10秒~5分钟的搅拌条件下以及之后的静置条件下实施步骤(b)。根据本发明,可以简化使用质谱分析的单克隆抗体的检测方法并在多样品分析中应用。
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公开(公告)号:CN111512152B
公开(公告)日:2023-08-11
申请号:CN201780097953.6
申请日:2017-12-28
Applicant: 株式会社岛津制作所
Abstract: 本发明提供一种样品中的单克隆抗体的检测方法,所述方法包括以下的步骤:(a)捕捉样品中的单克隆抗体并固定化于多孔体的细孔内的步骤;(b)使固定化有该单克隆抗体的多孔体与固定化有蛋白酶的纳米颗粒接触而进行单克隆抗体的选择性蛋白酶解的步骤;及(c)通过液相色谱质谱分析(LC‑MS)来检测利用选择性蛋白酶解而得到的肽片段的步骤,在步骤(a)之后,还包括(a’)进行在酸性条件下的还原反应的步骤。根据本发明,可以期待使用了质谱分析的单克隆抗体的检测方法的进一步的应用。
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公开(公告)号:CN107923874B
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN201680045133.8
申请日:2016-07-26
Applicant: 株式会社岛津制作所 , 国立研究开发法人国立癌症研究中心
IPC: G01N27/62 , G01N33/483 , G01N33/68
Abstract: 由于变异体而在生物体内的作用不同的蛋白质存在有多种。为了更准确地把握蛋白质在生物体内的作用而对样品中的蛋白质进行定量时,需要分别测定可能存在的各变异体的量。提供一种用质谱分析对具有2种以上变异体的蛋白质的各变异体进行平行定量的方法,其包含:对样品中的蛋白质进行蛋白酶消化,对于通过前述蛋白酶消化得到的肽中的、具有各变异体所特有的氨基酸序列的肽不进行分离而直接利用质谱分析进行检测,基于其结果确定样品中的各变异体的量。
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公开(公告)号:CN111656190A
公开(公告)日:2020-09-11
申请号:CN201880088090.0
申请日:2018-02-08
Applicant: 株式会社岛津制作所
IPC: G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/549 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供一种样品中的单克隆抗体的检测方法,所述方法包括以下的步骤:(a)捕捉样品中的单克隆抗体并固定化于多孔体的细孔内的步骤;(b)使固定化有该单克隆抗体的多孔体与固定化有蛋白酶的纳米颗粒接触而进行单克隆抗体的选择性蛋白酶解的步骤;及(c)通过液相色谱质谱分析(LC-MS)来检测利用选择性蛋白酶解而得到的肽片段的步骤,其为在离液试剂和还原剂的存在下、在pH8~9的条件下实施步骤(b)的选择性蛋白酶解的方法。
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公开(公告)号:CN117581103A
公开(公告)日:2024-02-20
申请号:CN202280044609.1
申请日:2022-04-08
Applicant: 株式会社岛津制作所
Abstract: 提供一种能够在不使用作为测定对象的抗体制作标准曲线的情况下通过质谱分析对抗体进行定量的方法。提供一种分析抗体的方法,其包括下述步骤:将生物蛋白及靶抗体用蛋白酶消化;对经消化的所述生物蛋白及所述靶抗体的肽片段进行质谱分析;和,基于通过所述质谱分析得到的所述生物蛋白的检测强度与所述靶抗体的检测强度之比,对所述靶抗体进行定量,所述用蛋白酶消化包括下述步骤:将所述生物蛋白及所述靶抗体固定在载体的微孔内;和,使具有大于所述微孔直径的直径且表面固定有所述蛋白酶的微粒与所述载体接近,所述生物蛋白具有能够固定在所述微孔内的结构域。
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公开(公告)号:CN109328297B
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN201680087171.X
申请日:2016-06-30
Applicant: 株式会社岛津制作所
Abstract: 容器组件包括过滤单元(10)、以及相对于过滤单元可拆装的封闭单元(30)。过滤单元具备:壳体(11),其一端设置有试样导入开口(18),另一端设置有液体排出开口(19);过滤器(21),被固定于壳体(11)。过滤单元的壳体具有第一接合部,封闭单元具有构成为可与第一接合部接合的第二接合部。第一接合部以及第二接合部构成为,在两者接合的状态下,液体排出开口在空间上被封闭。以缩短两者的距离的方式压入过滤单元与封闭单元,使得封闭单元与过滤器之间的空间相对于试样收容空间成为正压。
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公开(公告)号:CN107709980B
公开(公告)日:2020-11-06
申请号:CN201580080639.8
申请日:2015-06-01
Applicant: 株式会社岛津制作所 , 国立研究开发法人国立癌症研究中心
Abstract: 本发明提供一种单克隆抗体的定量方法,其包括如下步骤:使细孔内固定化有测定对象的单克隆抗体的多孔体、与固定化有特定的蛋白酶的微粒接触,进行单克隆抗体的选择性蛋白酶消化的步骤;以及,检测由前述消化得到的、包含源自前述单克隆抗体的重链或轻链的CDR2区的氨基酸的肽片段的步骤。
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